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更新時(shí)間:2024-07-09 13:36:55瀏覽次數(shù):1416評(píng)價(jià)
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離子交換填料 Epoxy act i vat ed Sephar ose 6B環(huán)氧活化 -瓊脂糖凝膠6B
貨號(hào):E8260
規(guī)格:100ml
保存:4℃~25℃,有效期5年。
一、簡(jiǎn)介
CM-瓊脂糖凝膠 FF 是將羧甲基鍵合在高流速瓊脂糖凝膠上形成的一種弱陽離子交換介質(zhì)。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
本品為白色球狀凝膠,無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。
二、親和填料特性
項(xiàng) 目 | 指 標(biāo) |
離子交換基團(tuán) | -O-CH COO - |
離子交換類型 | 弱陽離子,可交換離子Na |
基 質(zhì) | 6% 交聯(lián)瓊脂糖 |
蛋白質(zhì)吸附容量 | 60mg 溶菌酶/ml 介質(zhì) |
總離子交換量 | 0.09-0.13mmol/ml 介質(zhì) |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 4 球形5~165 μm |
流速 | 300~600 cm/h;大流速 750 cm/h |
工作溫度 | 4~40 ℃ |
耐壓 | 0.3MPa |
耐熱 | pH7 水中 120℃30min |
pH 值穩(wěn)定性 | 4~13(長(zhǎng)時(shí)間) |
pH 工作范圍 | 6~10 |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 在以下液體中穩(wěn)定:所有常用的水相緩沖液; 1mol/L 氫氧化鈉;8mol/L 尿素;6mol/L 鹽酸 胍;70% 乙醇 |
*檢測(cè)條件: 層析柱 10mm×300mm *柱床高 15cm,25℃,流動(dòng)相為 0.1mol/LNaCl。.
三、 適用范圍
本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),適用于在 pH 工作范圍內(nèi)可形成正離子的生物大分子的分離純化,廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。
四、操作說明
1 裝柱
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。
(2)根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠,清洗掉 20%乙醇,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
(3) 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位 (液面略高于濾膜) , 務(wù)必使底端無氣泡。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的 1.33 倍的流速流過,使柱床穩(wěn)定。用 2~3 倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
2 平衡
讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子, 到流出液電導(dǎo)和 pH 不變。 平衡液是低濃度的緩沖溶液, 如 NaAC、PBS 等。
3 上樣
(1)樣品用平衡液配制,渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。
(2)一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上,用平衡液洗去雜質(zhì),再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。
(3)介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動(dòng)相的離子強(qiáng)度和 pH 值。鹽濃度小,介質(zhì)對(duì)樣品組分吸附較牢。用 CM 介質(zhì)時(shí),推薦的 pH 值是小于目標(biāo)產(chǎn)品等電點(diǎn) 1 個(gè)單位。
4 洗脫
CM 介質(zhì)可用增大鹽濃度或增大 pH 值進(jìn)行洗脫,常用增大鹽濃度的辦法洗脫。
5 再生
一般用高鹽濃度的緩沖液(含 1~2mol/L NaCl)洗或增大 pH 洗 10 倍以上柱體積,接著用結(jié)合蛋白的平衡液洗到平衡,可再次使用。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
6 在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用 2M Nacl 去除。
(2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用 1M NaOH 去除。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用 4~10 倍柱體積的 70%乙醇或 30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用少 3 倍緩沖液平衡柱子。
7 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入。
8 去熱源
用 0.5M 的氫氧化鈉清洗柱子 5~6 小時(shí)或用 0.1M 的氫氧化鈉 24 小時(shí)?;蛴靡韵路椒ú襟E去除:
(1)2 倍柱體積的 70%乙醇;
(2)2 倍柱體積 50mM Tris-Hcl pH7.5;
(3)1 倍柱體積 4M 尿素;
(4)3 倍柱體積的 Tris 緩沖液+0.1M Nacl;
以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。
9 消毒
用 0.5~1M NaOH 室溫下洗 8~10 倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。
10 滅菌
置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中 120℃下 30 分鐘。
五、注意事項(xiàng)
產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在 4℃~25℃(保存溶液為 20% 乙醇) ,通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。用過的柱子貯存在 4℃(20% 乙醇) 。避免與氧化劑接觸;避免在 pH< 4 的環(huán)境中長(zhǎng)時(shí)間暴露(一周,20℃)。
離子交換填料 Epoxy act i vat ed Sephar ose 6B環(huán)氧活化 -瓊脂糖凝膠6B訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
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6B運(yùn)輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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