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透析袋 扁寬32 截留分子量8000
貨號:YA1042
規(guī)格:0.5M
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價: | 選擇規(guī)格 |
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YA1042-0.5M | Solarbio | 0.5M | 600.00元 |
使用前處理:
1. 把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。
2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。
3. 用蒸餾水*清洗透析袋。
4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。
5. 冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。
6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出,將之清洗干凈。
透析袋寬度:32mm
截留分子量:8000D
長度:0.5米
材質(zhì):再生纖維素
使用前只需用水漂洗,即可去除膜表面的防腐劑。
應(yīng)用
• 去除鹽分、表面活性劑以及溶劑
• 緩沖液置換或 pH 值調(diào)整
• 蛋白質(zhì)、多肽或抗體濃縮
• DNA電洗脫
• 電泳前蛋白質(zhì)準(zhǔn)備
• 去除小分子雜質(zhì)
• 親和研究(受體-配體結(jié)合研究)
• 組織培養(yǎng)物的提取純化
對樣品進(jìn)行透析之前,需要考慮諸多因素。影響透析效率的一些因素包括樣品溶質(zhì)、膜化學(xué)相容性、膜截留分子量、透析緩沖液性質(zhì)、透析體積、溫度等。因此,有必要針對下列透析程序作一些優(yōu)化。
透析參數(shù)和截留分子量的選擇
樣品和透析溶液濃度
一般除要保留的大分子產(chǎn)品和要去除的雜質(zhì)外保持*
樣品/透析液使用量比例
常用 1 : 50 - 500 體積比
膜截留分子量 /MWCO
要保留分子量的50-90%
樣品體積和透析膜面積比例
長度 (10-15 厘米) x FW (24-30 毫米) , 2-5 ml/cm
溫度
常用室溫 (20-25 C) “靜態(tài)” 透析并配合攪拌
溶液置換間隔
3 次: 3-4 小時, 6-8 小時 & 16-24 小時
透析時間
1 – 2 天
實驗室透析 常見問題解答
Q1:如何準(zhǔn)備透析膜管?
透析膜管的準(zhǔn)備因膜管材質(zhì)和生產(chǎn)工藝的差別而有所不同。
注意,我們不推薦煮沸處理,因其可能損壞膜管并改變膜孔徑。
A) 生物技術(shù)級 RC、CE 及 PVDF 膜可以用 DI 水沖洗 15-30 分鐘,去除防腐劑。
B) Spectra/Por ○
R 7 標(biāo)準(zhǔn)級 RC 膜已經(jīng)預(yù)處理,去除了重金屬和硫化物,只需在去離子水中浸泡 15-30 分鐘,去除防腐劑即可。
C) Spectra/Por ○
R 1-6 標(biāo)準(zhǔn)級 RC 膜,一般情況下,在水中漂洗足以去除甘油或防腐劑,而對于親和研究之類極其敏感的透析應(yīng)用或者重金屬及硫化物會影響透析樣品下游分析的應(yīng)用,可能需要一些額外的處理以去除在生產(chǎn)過程中引入的痕量水平重金屬及硫化物,索萊寶提供兩種膜預(yù)處理溶液:重金屬漂洗液及硫化物清除液,具體產(chǎn)品信息請參考“膜透析配件”網(wǎng)頁說明。
Q2:透析的原理是什么?一般需要多長時間才能完成?
透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下,選擇性擴(kuò)散通過半透膜,從而達(dá)到大/小分子分離,膜兩側(cè)濃度平衡,即小顆粒的溶質(zhì)通過膜,而大分子物質(zhì)不能通過,被截留在膜另一邊。
如果將樣品置于透析膜管內(nèi),通過置換膜管外部的透析緩沖液,可將小顆粒物質(zhì)清除,從而
達(dá)到純化大分子物質(zhì)的目的。一般來說,之內(nèi)置換 3-5 次緩沖液,然后在室溫條件下,
放在攪拌臺上隔夜透析,即可達(dá)到高效的透析結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)的透析操作一般需要 16-24 小時。
許多因素會影響透析效率,包括:擴(kuò)散系數(shù)、pH 值、溫度、時間、物質(zhì)濃度、樣品體積、
透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速
率。
Q3:透析一個樣品需要多少體積的透析緩沖液?緩沖液置換頻率怎么安排?
透析緩沖液的體積越大,小分子擴(kuò)散的驅(qū)動力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100:1。當(dāng)擴(kuò)散速率降低,膜兩側(cè)溶液趨于平衡時,通過置換緩沖液,可維持小分子擴(kuò)散驅(qū)動力和透析速率。我們一般推薦在 12-24 小時內(nèi),置換緩沖液 2 到 3 次,具體安排如下:*次緩沖液置換:透析開始后 2-3 小時第二次緩沖液置換:透析開始后 4-5 小時
后一次緩沖液置換:透析隔夜之前
Q4:如何選擇正確的截留分子量(MWCO)?
截留分子量應(yīng)該竟可能的大,以使透析速率大化。但是,為了獲得大的樣品回收率,選擇的截留分子量應(yīng)少為需純化的大分子物質(zhì)分子量的一半。對于需對幾種分子進(jìn)行分離的應(yīng)用,分子之間的分子量差少為 5 倍,才能完成有效的膜透析。若不能滿足分子量差的要求,可能需要使用其它的分離技術(shù),如色譜方法或切向流過濾。
Q5:那種膜的蛋白質(zhì)結(jié)合率低?
每種膜對不同的分子具有不同的親和性。對于球狀蛋白,相對的結(jié)合親和性由低到高為 CE<RC<PVDF。
Q6:怎樣為膜管選擇合適大小的膜夾?
標(biāo)準(zhǔn) RC 膜(Spectra/Por 1-7)和生物技術(shù)級 RC 膜由柔韌的再生纖維素聚合物制造,可使用任何一種透析膜夾密封。生物技術(shù)級 CE & PVDF 膜由相對剛性的聚合物制造,需要使用相對溫和的通用膜夾。鑒于通用膜夾對于所有類型的膜管都能起到很好的密封作用,如不確定選擇哪種膜夾合適,使用通用膜夾即可。標(biāo)準(zhǔn)膜夾一般只用于標(biāo)準(zhǔn)級 RC 膜管。
膜夾的密封寬度一般需比膜管的扁平寬度長 4-10 mm。通用膜夾的小密封寬度為 50 mm。對于所有扁平寬度規(guī)格的仕必純生物技術(shù)級膜管,均有相應(yīng)的膜夾可供選擇。
Q7:透析膜的保存時間為多長?
干包裝的透析膜可保存 5 年。濕包裝的透析膜(0.1% 的防腐劑溶液)保存期限為 3 年。輻照滅菌的透析膜可保存 1.5 年。
Q8:透析膜變干或凍存之后是否仍可使用?
濕潤的透析膜變干之后,孔徑受到不可逆的影響,膜變得脆弱易碎,容易泄露,不推薦繼續(xù)使用。透析膜凍存之后,冰晶會使膜破裂,導(dǎo)致泄露,此時不推薦使用該膜。
Q9:透析膜*不含內(nèi)毒素嗎?
仕必純確認(rèn)所有透析膜不含有內(nèi)毒素,符合普通實驗室使用規(guī)格要求。
Q10:我需要擔(dān)心透析膜上的皺紋、滾痕或折線嗎?
只要膜是完整的,滾痕或者折線不會影響膜的擴(kuò)散特性。
Q11:CE 膜比 RC 膜更具剛性,且不透明嗎?
纖維素酯(CE)膜內(nèi)的聚合物交聯(lián)形成相對剛性的晶格,而再生纖維素(RC)聚合物形成更加柔韌的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)。不透明性是由網(wǎng)格中孔眼的大小所決定的,孔眼越大,膜越不透明。
Q12:透析膜可以化學(xué)密封或熱密封嗎?
CE 和 RC 透析膜只能機(jī)械密封,但 PVDF 透析膜可以機(jī)械密封或熱密封,通常用于樣品“封裝”目的。
Q13:處理相同的蛋白樣品,Spectra/Por ○R 透析膜可重復(fù)使用嗎?
我們不推薦重復(fù)使用透析膜,因為特定的處理操作可能會對膜造成污染,一定的透析條件(pH 值、溫度、化學(xué)接觸等)也會對膜的完整性造成損害,和/或?qū)е滦孤?,特別是在打開和重新夾上膜夾時。
Q14:膜孔徑有多,什么是 MWCO?
透析膜微觀下呈海綿狀結(jié)構(gòu),因此,更適合通過評定其截留性能來間接地定義“孔徑”,亦即“截留分子量”(Molecular Weight Cut Off,MWCO)。MWCO 定義為在 17 個小時內(nèi),膜截留率為 90%的溶質(zhì)分子量?;诖硕x,選擇透析膜時,MWCO 應(yīng)小于需要截留的分子的大小。
Q15:透析膜 Spectra/Por ○
R 2 和 4 有什么區(qū)別?
Spectra/Por ○
R 2 和 4 都有 12-14 kD 的截留分子量。Spectra/Por ○ R 透析膜更適合溫和透析,
Spectra/Por ○
R 2 可提供特定的更大和更小的扁平寬度,和/或滲透性;也就是說,Spectra/Por ○ R
2 的水滲透性比 Spectra/Por ○
R 4 更*。
Q16:關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒有經(jīng)驗法則?
表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長度的膜管,扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積,而扁平寬度較大的膜管比表面積相對較小,也就是說,前者的透析速率更快。原因是扁平寬度較小的膜管,溶質(zhì)的擴(kuò)散距離較短,溶質(zhì)之間通過膜孔的競爭也較小。而扁平寬度大,亦即溶質(zhì)到達(dá)膜表面的距離也較長,溶質(zhì)之間對膜孔的競爭也較大。一般而言,比表面積越大,透析越快。
Q17:如果膜兩側(cè)的摩爾滲透壓濃度相等,但濃度梯度仍然存在,物質(zhì)的通過效率如何?
大多數(shù)透析結(jié)束時膜兩側(cè)滲透壓相同。透析過程是由膜管內(nèi)外兩側(cè)的濃度梯度驅(qū)動的。如果滲透壓力有很大的差別,水會通過膜以平衡膜兩側(cè)的滲透壓。如果過多的水通過膜,透析膜管可能會隨水運(yùn)動的方向增大或縮小,在體積增加到一定程度時,有可能導(dǎo)致膜夾松動或膜管破裂。
Q18:進(jìn)行超濾時,透析膜能承受多大的壓力?
透析膜設(shè)計不適合用于壓力過濾。在不影響截留分子量的前提下,大推薦壓力為 1.5 psi。
Q19:一般推薦使用哪種透析液(緩沖液)?
生物分子必須保存在嚴(yán)格的 pH 值控制條件下,以穩(wěn)定其分子極性。典型的透析緩沖液 pH范圍為 6-8。以下為常用的幾種可以作為緩沖液的生化溶液:
? 水
? PBS
? TBS
? HEPES
? 氨基酸緩沖液
Q20:為什么使用微米 vs 道爾頓(MW)單位,怎么轉(zhuǎn)換?
溶解的分子大小以分子量來定義,單位為道爾頓,而顆粒和細(xì)胞大小常以直徑來定義,由于分子的結(jié)構(gòu)和形態(tài)不同,相同分子量的物質(zhì),分子大小和形態(tài)可能相差較大,兩者之間沒有的對應(yīng)關(guān)系。出于這個原因,許多常見的生物材料都已特別定性,并將大約的尺寸標(biāo)注在轉(zhuǎn)換表上作為估算的參考,以用于透析、超濾和微濾應(yīng)用。道爾頓與微米單位之間的轉(zhuǎn)化,請參考索萊寶“孔徑表”。
Q21:對于鹽濃度較高的樣品,佳的透析方法是什么?
如果可能,我們推薦使用低鹽濃度的緩沖液。不推薦直接使用純 DI 水作為緩沖液,因為滲透壓力可能將水引入膜管,使樣品體積膨脹并可能導(dǎo)致膜管破裂。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止?jié)B透壓力導(dǎo)致的膜管膨脹。每次緩沖液置換,可將溶質(zhì)濃度降低十分之一,也就是說,透析一個 5M NaCl 的樣品,可使用 500 mM NaCl 的緩沖液。
Q22:可以使用繩子結(jié)扎膜管,而不使用膜夾嗎?
我們不推薦使用繩子結(jié)扎膜管。因為繩結(jié)對膜管的損害具有很大的不確定性,并且可能不能提供有效的密封,而導(dǎo)致泄露。只有膜夾才能提供足夠的密封性,從而保護(hù)樣品。
Q23:透析膜管應(yīng)該剪多長?
對于每種膜管扁平寬度,仕必純提供相關(guān)的容積/長度比,可方便計算透析樣品所需的膜管長度。如果扁平寬度為 16 mm,容積/長度比為 0.79 ml/cm,要容納 5 ml 的樣品,則需要大約 6.5 cm 長的膜管。但是,為保持樣品漂浮,一般需要在頂部空間預(yù)留 10-20%膜長(約為1 cm)。此外,也需在兩端為膜夾各預(yù)留 2 cm。所以總的膜管長度應(yīng)少為 11.5 cm。
可根據(jù)以下公式計算膜管長度:
總長度=(樣品體積)/(容積/長度)+(額外的 10-20%)+4 cm
瀏覽網(wǎng)頁,使用仕必純透析膜管計算器,根據(jù)樣品體積和扁平寬度,計算所需的膜管長度。
實驗室耗材
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YA1053 透析袋 扁寬45 截留分子量2000 Solarbio 0.5m/即用型
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YA1071 透析袋MD25(8000-14000)D Solarbio 5M
YA1072 透析袋MD34(8000-14000)D Solarbio 5M
YA1073 透析袋MD44(8000-14000)D Solarbio 5M
YA1074 透析袋MD55(8000-14000)D Solarbio 5M
YA1075 透析袋MD77(8000-14000)D Solarbio 5M
YA1076 透析袋MD34 ( 7000 D ) Solarbio 5M
YA1077 透析袋MD34 ( 3500 D ) Solarbio 5M
YA1078 透析袋MD44 ( 3500 D ) Solarbio 5M
YA1080 透析袋MD25(3500D ) Solarbio 5M
YA1081 透析袋MD25(7000D ) Solarbio 5M
YA1082 透析袋MD44(7000D ) Solarbio 5M
YA1083 透析袋MD55(3500D ) Solarbio 5M
YA1084 透析袋MD55(7000D ) Solarbio 5M
透析袋 扁寬16 截留分子量1000000訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
透析袋 扁寬16 截留分子量1000000運(yùn)輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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