番紅O固綠染色實驗服務(wù)
番紅0固綠染色服務(wù)介紹
番紅0固綠染色(軟骨)在涉及關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中,常需要聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學(xué)結(jié)構(gòu)。中,起源于上世紀(jì)60年代的番紅0 (safranin 0) -固綠(fast green)染色因可以直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織結(jié)構(gòu)而備受青睞。軟骨呈紅色,成骨呈綠色。
番紅0固綠染色實驗意義
番紅0固綠染色染色是針對軟骨及植物進行染色的方法,此方法簡易,節(jié)約時間、用具器皿及藥品,染色清晰。
實驗步驟:
1軟骨染色步驟:
①骨組織固定、脫鈣,制成石蠟切片。
②切片常規(guī)脫蠟至水。
③入新鮮配制的weigert染液染色。
④流水沖洗。
⑤酸性乙醇分化液分化。
⑥蒸餾水洗。
⑦在固綠染色液內(nèi)浸染。
⑧蒸餾水洗。
⑨入番紅0染液內(nèi)浸染。
(10)蒸餾水洗。
(11)用乙酸溶液洗滌切片,以便去除殘留的固綠,再用蒸餾水洗。
(12)分別用95%乙醇、無水乙醇脫水。
(13)二甲苯透明,中性樹脂封固。
(14)鏡檢。
2.植物染色步驟:
①標(biāo)本的處理:固定,切成石蠟切片。
②粘片。
③脫蠟:二甲苯-50%二甲苯+50%乙醇- -100%乙醇- -95%乙醇- -85%乙醇- -70%乙醇- -50%乙醇- -30%乙醇- -水。
④入番紅0染色液染色。
⑤酸性乙醇分化液分化15s。
⑥脫色: 35%乙醇- -50%乙醇- -70%乙醇- -80%乙醇。
⑦水洗1min。
⑧入固綠染色液內(nèi)浸染,蒸餾水洗1min。
⑨無水乙醇脫水3-5min,無水乙醇脫水,50%二 甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。
(10)樹脂封固。
染色結(jié)果:
(1)軟骨染色結(jié)果:
軟骨基質(zhì)深紅色:軟骨細胞核藍色;細胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈灰綠色。
(2)植物染色結(jié)果:
木質(zhì)化、木栓化的細胞壁染成紅色;纖維素細胞壁染成綠色:導(dǎo)管染成紅色,篩管染成綠色。
實驗技巧5:
(1)軟骨染色:
固綠與膠原纖維結(jié)合,不宜褪色,番紅o-固綠染色的分化很關(guān)鍵,分化過度容易導(dǎo)致切片不著色,分化不足易導(dǎo)致切片著色
過深。
(2)植物染色:
番紅染色后,在50%乙醇中脫色需經(jīng)實踐,如果脫色不夠綠色會不好染;脫色過度會導(dǎo)致紅色過淡,甚至全部綠色。
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