以雙抗體夾心法為例，上海研域生物對ELISA試劑盒簡要操作步驟如下：

　　包被抗體包被到酶標板

　　加樣本/標準品

　　加生物s標記的檢測抗體

　　加HRP標記的鏈霉親和素

　　加顯色底物TMB

　　加終止液

　　ELISA 試劑盒組分

　　酶標板(Microplate)

　　酶標板，在ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)中作為載體的酶標板對抗原抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附起著重要作用。

　　標準品(Standard)

　　標準品即為已知濃度的目標物(樣本中待測因子)的純蛋白，對標準品進行梯度稀釋，用于制作標準曲線。

　　生物s標記的檢測抗體(Detected Antibody)

　　檢測抗體即為與目標物特異性結(jié)合的抗原/抗體鑒于酶標二抗的局限性，現(xiàn)在廠家一般引入生物s親和素系統(tǒng)(biotin avidin system,BAS)。

　　洗滌液(Washing Buffer)

　　長時間的孵育后，會出現(xiàn)非特異性結(jié)合，這時就需要洗滌液來洗去非特異性結(jié)合的蛋白或抗體。常用的洗滌液有:磷酸鹽緩沖液(PBS)、平衡鹽緩沖液(BBS)等。

　　辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)

　　鏈霉親和素是Streptomyces avidinii(阿維丁鏈霉菌)的分泌物。鏈霉親和素分子由4條相同的膚鏈組成，非特異性結(jié)合遠比親和素低。在ELISA試劑盒中，用于與檢測抗體上的生物s相結(jié)合。

　　TMB在過氧化氫存在的情況下可被HRP或其他過氧化物酶催化生成可溶的藍色物一價物。當(dāng)顯色反應(yīng)被酸性溶液終止后，產(chǎn)物由藍色一價物轉(zhuǎn)為黃色二價物，此時可在450nm 測定吸光度

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