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Cygnus產(chǎn)品及應(yīng)用選擇指南
點(diǎn)擊次數(shù)：5064 發(fā)布時(shí)間：2011-10-7
| Cygnus產(chǎn)品及應(yīng)用選擇指南 : | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 部分藥品來(lái)源于生物組織，但產(chǎn)量有限，所以其價(jià)格十分昂貴。微生物/細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，容易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。利用基因工程將合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，讓其產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題，還能大大降低生產(chǎn)成本。 基因工程圖
基因工程大大改變了現(xiàn)有制藥生產(chǎn)的狀況，但是基因工程產(chǎn)品中殘留的宿主細(xì)胞蛋白是影響制品純度的重要因素,反復(fù)使用含宿主細(xì)胞蛋白的基因工程制品有可能引起機(jī)體的過(guò)敏反應(yīng)。目前應(yīng)用于人類(lèi)疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程主要采用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）作為宿主細(xì)胞。因制品中細(xì)胞蛋白殘留量低 ,用常規(guī)的理化方法無(wú)法檢測(cè),為此需要建立細(xì)胞蛋白殘留量測(cè)定方法,對(duì)半成品進(jìn)行檢定,從而更有效地保證制品的質(zhì)量 ,提高制品的安全性。 Cygnus technologies, Inc.是美國(guó)一家專(zhuān)門(mén)從事生物工程和制藥過(guò)程中殘留物檢測(cè)的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過(guò)程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過(guò)程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測(cè)生物工程殘留物的產(chǎn)品， Cygnus公司檢測(cè)產(chǎn)品覆蓋了常用于基因工程的培養(yǎng)細(xì)胞以及一些用于細(xì)胞培養(yǎng)的添加物。CHO細(xì)胞即中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（Chinese hamster ovary），該細(xì)胞具有不死性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細(xì)胞。*批準(zhǔn)正式應(yīng)用于人類(lèi)疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程產(chǎn)品約有三十多種，其中只有一種（乙肝疫苗）是由酵母菌生產(chǎn)的，其余所有產(chǎn)品都是由CHO細(xì)胞和大腸桿菌生產(chǎn)的，大腸桿菌不能形成有活性的二聚體（如白介素2），也不具有糖基化的功能（如EPO），而CHO卻具有如上的功能，因此CHO成為表達(dá)復(fù)雜生物大分子的理想宿主。另外CH0細(xì)胞在基因工程使用中還有一個(gè)優(yōu)點(diǎn)，該細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞（fibroblast），是一種非分泌型細(xì)胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因而檢測(cè)起來(lái)很困難。  一、 Cygnus Elisa檢測(cè)產(chǎn)品 共有39種Elisa 檢測(cè)試劑盒，包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測(cè)試劑盒等。 公司產(chǎn)品：
1.CHO HCP ELISA kit（F015） zui常用的用于檢測(cè)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞宿主蛋白試劑盒。 1）CHO HCP ELISA kit（F015）盒子組成
2）操作流程（中文操作流程僅供參考，實(shí)驗(yàn)請(qǐng)參照原裝英文說(shuō)明書(shū)）
客戶可以根據(jù)檢測(cè)靈敏度的需要，選擇其中一種檢測(cè)方法。
兩種操作方法的比較：
2. E.coli HCP ELISA kit（F410） 針對(duì)利用E.coli生產(chǎn)相關(guān)藥物的客戶，檢測(cè)大腸桿菌宿主蛋白殘留物的利器。 1）E.coli HCP ELISA kit（F410）盒子組成
2）操作流程（中文操作流程僅供參考，實(shí)驗(yàn)請(qǐng)參照原裝英文說(shuō)明書(shū)）
3. Pichia pastoris HCP ELISA kit（F140） 真核表達(dá)系統(tǒng)（畢赤酵母）宿主細(xì)胞殘留物檢測(cè)試劑盒。 1）Pichia pastoris HCP ELISA kit盒子組成
2）兩種不同的操作流程
兩種操作方法的比較：
4. BSA ELISA kit （F030） 細(xì)胞培養(yǎng)添加物BSA的檢測(cè)試劑盒。 1）BSA ELISA kit （F030）盒子組成
2）操作步驟
5. Protein A的檢測(cè)試劑盒 針對(duì)開(kāi)發(fā)抗體藥，檢測(cè)純化過(guò)程中殘留的Protein A，也有其他相關(guān)應(yīng)用，分為三款F050、F050H和F400，其中F400是產(chǎn)品，是靈敏度zui高、效果的檢測(cè)Protein A的試劑盒。 1）三個(gè)試劑盒的組成
2）三個(gè)試劑盒的差別
二、Cygnus WB檢測(cè)產(chǎn)品 WB也是檢測(cè)宿主細(xì)胞蛋白的手段，Cygnus的WB kits里的抗體跟相應(yīng)的Elisa Kits是一樣的，WB kits里面包括酶標(biāo)抗體、陽(yáng)性抗原、酶底物和封閉濃縮液，Cygnus的WB產(chǎn)品共有11種。具體產(chǎn)品可以參照下列（http://www.cygnustechnologies.com/category/western-blot-kits.html ） 部分WB產(chǎn)品：
三、 Cygnus免疫學(xué)產(chǎn)品 免疫學(xué)產(chǎn)品全部是Elisa和WB盒子里面的相關(guān)產(chǎn)品，提供抗體、抗原濃縮液（對(duì)照/標(biāo)準(zhǔn)品）、緩沖液和洗滌液等。 大部分抗體為山羊和兔來(lái)源，偶有豬抗，抗體貨號(hào)有前后綴，不同后綴代表的意思不同。Cygnus抗體共有117種，眾多抗體產(chǎn)品參照下列*：http://www.cygnustechnologies.com/category/antibodies.html 抗體的前綴/后綴代表的意義： PA或者PG是IgG片段 AF是親和純化的抗體 AF-AP偶聯(lián)了AP的親和純化抗體 AF-B偶聯(lián)了生物素的親和純化抗體 AF-HRP是偶聯(lián)了HRP的親和純化抗體 下面為部分抗體產(chǎn)品：
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