上海博耀生物科技有限公司
主營產品: elisa試劑盒,一抗,二抗,抗體,ABI |
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參考價 | ¥ 1800 |
訂貨量 | 1 |
更新時間:2018-09-12 09:53:12瀏覽次數(shù):842
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人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA試劑盒
Human peptide major histocompatibility complex,pMHC ELISA Kit
包裝:96T/48T
檢測標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。
保存:2-8℃,一年。
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人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA試劑盒供應商:
上海博耀生物科技公司是專業(yè)的ELISA試劑盒供應商!本公司專業(yè)經銷elisa試劑盒、omega試劑盒、抗體、動物血清、標準品等生物試劑,產品質量有保證,售后服務有保障。垂詢!
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細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的 成份時,用 PBS ( PH7.2-7.4 )稀 釋細胞懸液,細胞濃度達到 100 萬 /ml 左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的 PBS ,緩沖液中可加入 1 μ g/L 蛋白酶抑制劑或 50U/ml 的 Aprotinin ( 抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻 漿充分。離心 20 分鐘左右( 2000-3000 轉 / 分)。仔細收集上清置于 -20 度或 - 70 度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:800pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀稀
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素標記的抗IFN-γ抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
試劑的準備
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
800 pg/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
400 pg/ml (5號標準品) 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
200 pg/ml (4號標準品) 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
100 pg/ml (3號標準品) 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
50 pg/ml (2號標準品) 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
25 pg/ml (1號標準品) 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 pg/ml (空白對照) 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
樣品采集:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆?將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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