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human IgM (免疫親和純化)人IgM

免疫球蛋白抗原

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抗體(antibody)
指機(jī)體的免疫系統(tǒng)在抗原刺激下,由B淋巴細(xì)胞或記憶細(xì)胞增殖分化成的漿細(xì)胞所產(chǎn)生的、可與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的免疫球蛋白。主要分布在血清中,也分布于組織液及外分泌液中。
一抗體和二抗體:
一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。
*抗體就是我們平時(shí)所說(shuō)的抗體,它能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合,即抗體的抗體,其主要作用是檢測(cè)抗體的存在。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
  3、動(dòng)物免疫。  
 4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
  抗體的功能:
  抗體的主要功能是與抗原(包括外來(lái)的和自身的)相結(jié)合,從而有效地清除侵入機(jī)體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活,也可能無(wú)效但有時(shí)也會(huì)對(duì)機(jī)體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,對(duì)人體可造成危害。
抗體的親和力 :
是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol,通常K的范圍在 108 ~1010 /mol,也有多達(dá) 1014 /mol??贵w親和力的測(cè)定對(duì)抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
單克隆抗體:
  (monoclonal antibody,McAb)克隆選擇學(xué)說(shuō):淋巴細(xì)胞在與抗原接觸前就已經(jīng)存在多種多樣的與抗原專一性結(jié)合的受體,一種細(xì)胞帶一種受體,進(jìn)入機(jī)體的抗原選擇性的結(jié)合其中的個(gè)別淋巴細(xì)胞,使之活化,增殖產(chǎn)生大量帶有同樣受體的細(xì)胞群,分泌同樣的抗體。當(dāng)抗原進(jìn)入體內(nèi),在機(jī)體中就會(huì)誘導(dǎo)出針對(duì)不同抗原決定簇的多種抗體,如果要把這些抗體一一分開,用現(xiàn)有的生物化學(xué)或物理化學(xué)方法是根本辦不到的。1975年科勒(Kohler)和米爾斯坦(Milstein)將小鼠免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,培養(yǎng)出既能迅速生長(zhǎng)無(wú)限繁殖又可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。從而獲得針對(duì)某一特殊抗原決定簇的單克隆抗體。1995年,Katherine Knight博士在美國(guó)芝加哥Loyola大學(xué)成功地從轉(zhuǎn)基因兔中獲得了骨髓瘤細(xì)胞(Plasmacytoma),開創(chuàng)了兔單克隆抗體技術(shù)。與鼠單抗相比,兔單抗具有:首先,兔抗血清通常含有高親和力抗體,可以比鼠抗血清識(shí)別更多種類的表位;其次,兔單克隆抗體能夠識(shí)別許多在小鼠中不產(chǎn)生免疫的抗原;第三,由于兔脾臟較大,可以更多進(jìn)行的融合試驗(yàn),使得高通量篩選融合成為可能。


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