《液相色譜儀LC-2030操作規(guī)程》

一、分析前準(zhǔn)備

1.1 將流動(dòng)相（色譜純級(jí)別的甲醇、乙腈或去離子水）經(jīng)過(guò)0.45um的微孔濾膜過(guò)濾后，倒入流動(dòng)相瓶中，放入超聲波清洗器內(nèi)震蕩排氣20分鐘左右（注意將瓶蓋輕輕蓋上防灰）

1.2 將處理好的流動(dòng)相放在儲(chǔ)液托盤(pán)上，將對(duì)應(yīng)通道的洗液管路分別放入流動(dòng)相瓶中，蓋好瓶蓋并記好對(duì)應(yīng)通道的流動(dòng)相種類(lèi)。

1.3 將樣品處理稀釋后使用注射器過(guò)濾頭過(guò)濾后裝入1.5ml樣品瓶中（大約三分之二），放入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品架上，并記錄樣品瓶位置以便設(shè)置批處理文件。

1.4 打開(kāi)柱溫箱門(mén)，將色譜柱的出口端安裝在色譜柱夾具上，在色譜柱上連接配管，在色譜柱出口端連接檢測(cè)器入口端的藍(lán)色PEEK管。

1.5 檢查清洗液，在RINSE通道內(nèi)放置50%甲醇：水溶液；含有兩根管路的通道內(nèi)放置10%異丙醇：水溶液。（清洗液建議至少一月更換一次）

二、分析

2.1 打開(kāi)儀器左方的電源開(kāi)關(guān)，待自檢完成后，使用觸屏筆輸入登錄通行ID Number （默認(rèn)值為“00000”），按下OK進(jìn)入初始窗口

2.2 雙擊桌面的LabSolutions圖標(biāo)

在登錄菜單里，正確輸入用戶名和密碼（默認(rèn)用戶名為“admin”，密碼不填），點(diǎn)擊確定，進(jìn)入LabSolutions主項(xiàng)目

LabSolutions主項(xiàng)目包含4個(gè)子項(xiàng)目，“儀器”為在線采集項(xiàng)目；“處理工具”為離線處理數(shù)據(jù)項(xiàng)目；“管理工具”為軟件管理屬性設(shè)置項(xiàng)目；“手冊(cè)”為軟件在線使用手冊(cè)。

2.3 進(jìn)入在線采集雙擊如下圖標(biāo)，正常連接能聽(tīng)到“滴”的連接提示音，如硬件不匹配提示，請(qǐng)參考附錄，重新做系統(tǒng)配置

2.4  進(jìn)入數(shù)據(jù)采集界面后，看到以下畫(huà)面[img=,8,25]file:///C:/Users/陶振華/AppData/Local/Temp/ksohtml/wps8F23.tmp.png[/img]

2.5 選擇（新建或打開(kāi)）方法文件

點(diǎn)擊主項(xiàng)目下【數(shù)據(jù)采集圖片如下】的進(jìn)入數(shù)據(jù)采集項(xiàng)目，點(diǎn)擊工具欄中的新建或打開(kāi)快捷鍵新建或者打開(kāi)一個(gè)方法文件。

在“儀器參數(shù)”界面設(shè)置數(shù)據(jù)采集所需參數(shù)，主要包括：泵（模式：四元低壓梯度；流速；各通道流動(dòng)相比例和壓力上限）；

檢測(cè)器波長(zhǎng)、檢測(cè)池溫度；數(shù)據(jù)采集結(jié)束時(shí)間；柱溫箱溫度以及自動(dòng)排氣等。（控制器與自動(dòng)進(jìn)樣器參數(shù)一般保持默認(rèn)，如有梯度洗脫請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)在“時(shí)間程序”內(nèi)設(shè)置）

設(shè)置完成后，點(diǎn)擊“下載”并保存方法文件。

2.6 運(yùn)行儀器

2.6.1 自動(dòng)排氣：點(diǎn)擊工具欄內(nèi)的“自動(dòng)排氣”圖標(biāo)按照方法內(nèi)的設(shè)置進(jìn)行自動(dòng)排氣（一般針對(duì)當(dāng)天使用的流動(dòng)相通道，“RINSE”通道作為自動(dòng)進(jìn)樣器的洗針液必須保證每天排氣一次）

2.6.2 自動(dòng)排氣完成后，泵會(huì)自動(dòng)按照方法設(shè)定開(kāi)始輸送流動(dòng)相，柱溫箱開(kāi)始控制溫度。請(qǐng)檢查儀器運(yùn)行狀態(tài)，保證輸液泵、柱溫箱、檢測(cè)器運(yùn)行正常。

2.6.3 自動(dòng)排氣完成后，先輸送85%以上的甲醇（或乙腈）溶液沖洗管路20分鐘以上，再將流動(dòng)相比例更換為數(shù)據(jù)采集需要的比例。（若流動(dòng)相中含有緩沖鹽溶液，在更換至數(shù)據(jù)采集的比例前先使用10%的甲醇：水溶液過(guò)度30分鐘，詳細(xì)請(qǐng)查看“島津液相色譜流動(dòng)相使用方法”一文）

2.6.4 觀察儀器的壓力線與檢測(cè)器信號(hào)線，待兩條線都平穩(wěn)說(shuō)明儀器的色譜條件穩(wěn)定，可以進(jìn)樣。

2.7 進(jìn)樣

2.7.1 單次進(jìn)樣：

點(diǎn)擊助手欄（或工具欄）內(nèi)的“單次分析”圖標(biāo)，在打開(kāi)的對(duì)話框中設(shè)置數(shù)據(jù)文件的文件名以及保存路徑（DB軟件無(wú)需設(shè)置數(shù)據(jù)文件保存路徑）；

樣品名和樣品ID可根據(jù)需要填寫(xiě)或不寫(xiě)；

根據(jù)樣品瓶放置位置設(shè)置“樣品瓶”和“樣品瓶架”（如果需要運(yùn)行空針，可將樣品瓶號(hào)設(shè)置為-1）；

設(shè)置“進(jìn)樣體積”（LC-2030標(biāo)準(zhǔn)定量體積設(shè)定范圍是0.1-100uL）。設(shè)置完成后點(diǎn)擊“確定”開(kāi)始單次分析。

2.7.2 批處理進(jìn)樣：

點(diǎn)擊主項(xiàng)目里的“批處理分析”進(jìn)入批處理分析項(xiàng)目界面，新建或打開(kāi)一個(gè)批處理文件。點(diǎn)擊菜單欄內(nèi)“編輯”下的“表簡(jiǎn)單設(shè)置”彈出下面的對(duì)話框。

根據(jù)需要選擇“新建”或“添加”批處理表，檢查方法文件是否正確“一般會(huì)默認(rèn)打開(kāi)數(shù)據(jù)采集界面新建或打開(kāi)的方法文件”；

根據(jù)樣品放置順序設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品與未知樣品的“樣品瓶號(hào)”、“樣品架號(hào)”、“進(jìn)樣次數(shù)”、“進(jìn)樣體積”并設(shè)置數(shù)據(jù)文件名，點(diǎn)擊確定生成批處理表。

確認(rèn)各項(xiàng)參數(shù)無(wú)誤（如需修改可單擊對(duì)話框進(jìn)行修改），保存批處理表，點(diǎn)擊助手欄內(nèi)“批處理分析開(kāi)始”。

若中途想修改批處理表，可點(diǎn)擊“暫停”圖標(biāo)；若想終止批處理表，可點(diǎn)擊“停止”圖標(biāo)。

2.8 沖洗系統(tǒng)

樣品分析完成后，用分析時(shí)的條件沖洗系統(tǒng)一段時(shí)間，確認(rèn)柱子里不再有樣品。

分析使用緩沖鹽流動(dòng)相作反相分析的，再用10%甲醇水沖洗系統(tǒng)30min，然后用甲醇沖洗系統(tǒng)30min以上。

若分析中沒(méi)有緩沖鹽流動(dòng)相，直接用甲醇沖洗系統(tǒng)30min以上。（詳細(xì)請(qǐng)參照“島津液相色譜流動(dòng)相使用說(shuō)明”一文）。

2.9 關(guān)機(jī)

流路和色譜柱沖洗完成后，停止泵輸液與柱溫箱控溫，首先退出工作站，然后關(guān)閉儀器電源。

三、再解析

3.1 數(shù)據(jù)處理

單擊Labsolutions工作站的“處理工具”圖標(biāo)后雙擊“再解析”圖標(biāo)進(jìn)入數(shù)據(jù)處理界面（或者在“數(shù)據(jù)采集”界面中單擊左側(cè)助手欄內(nèi)“數(shù)據(jù)處理”圖標(biāo)）

點(diǎn)擊助手欄右側(cè)數(shù)據(jù)管理器右上角的文件夾圖標(biāo)打開(kāi)數(shù)據(jù)文件保存路徑，雙擊數(shù)據(jù)文件名打開(kāi)色譜圖（此時(shí)數(shù)據(jù)文件的內(nèi)容就會(huì)顯示在“數(shù)據(jù)處理”窗口內(nèi)）

單擊工具欄內(nèi)“手動(dòng)積分”圖標(biāo)，彈出“手動(dòng)積分欄”

可根據(jù)情況使用“手動(dòng)積分欄”內(nèi)的“去除峰”圖標(biāo)刪除色譜圖內(nèi)的雜質(zhì)峰；觀察下方峰表內(nèi)相應(yīng)色譜峰的峰面積用于計(jì)算濃度。

3.2 報(bào)告

點(diǎn)擊左側(cè)助手欄內(nèi)的“數(shù)據(jù)報(bào)告”圖標(biāo)，即可生成當(dāng)前圖譜的報(bào)告（單一譜圖的報(bào)告），可點(diǎn)擊工具欄內(nèi)的“打印”圖標(biāo)進(jìn)行打印圖譜

若需要進(jìn)行匯總報(bào)告，需先單擊左側(cè)助手欄內(nèi)“向?qū)?rdquo;圖標(biāo)完成5步向?qū)Ш髥螕糁黜?xiàng)目下“生成報(bào)告”圖標(biāo)進(jìn)入生成報(bào)告項(xiàng)目界面：在工具欄內(nèi)使用“匯總每個(gè)化合物”在報(bào)告區(qū)域畫(huà)一塊表格并進(jìn)行設(shè)置，后將色譜圖拖放至報(bào)告區(qū)域即可。（生成報(bào)告內(nèi)的報(bào)告模板可進(jìn)行保存以便下次使用）

3.3 校準(zhǔn)曲線

請(qǐng)參照“Labsolutions標(biāo)曲的建立”一文進(jìn)行操作。