詳細(xì)介紹
elisa原理 elisa實(shí)驗(yàn) DAO
產(chǎn)品名稱:人DAO ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名:人二胺氧化酶ELISA試劑盒
英文名稱:Human diamine oxidase,DAO ELISA KIT
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫
待檢樣本:體液,血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標(biāo)本等等。
保存條件:2-8℃
抗體捕捉ELISA 本法主要用于檢測IgM抗體。由于IgM抗體出現(xiàn)于感染早期,所以 檢測出IgM,則可作為某種疾病的早期診斷??贵w捕捉ELISA根據(jù)所用標(biāo)記方式不同可分為標(biāo)記抗原、標(biāo)記抗體、標(biāo)記抗抗體捕捉ELISA等幾種,其中以 標(biāo)記抗原捕捉ELISA比較有代表性,該方法的主要程序?yàn)椋?/span>
① 用抗u鏈(抗IgM重鏈)抗體包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜,洗滌三次、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋干
③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。
斑點(diǎn)ELISA(Dot-ELISA) 與常規(guī)的微量板ELISA比較,Dot-ELISA具有簡便、節(jié)省抗原等優(yōu)點(diǎn),而且結(jié)果可長期保存;但其也有不足,主要是在結(jié)果判定上比較主觀,特異性不夠高等。該方法的主要操作程序?yàn)椋?/strong>
(1) 載體膜的預(yù)處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后,稍加干燥進(jìn)行壓圈。將陰性、陽性抗原及被檢測抗原適度稀釋后加入圈中,置37℃使硝酸纖維素膜*干燥。每張7cm×2.3cm的膜一般可點(diǎn)加40-53個樣品,每個壓圈可加抗原液1-20μl。
(2) 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中,37℃感作15-30分鐘。封閉液多采用含有正常動物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(3) 加被檢血清 可直接在抗原圈上加,也可剪下抗原圈、置于微量板孔中,再加入一定量適度稀釋的待檢血清,37℃反應(yīng)一定時間,用洗滌液洗三次,每次1-3分鐘。洗滌液一般為一定濃度的PBS-Tween溶液。
(4) 加酶標(biāo)抗體,37℃反應(yīng)一定時間后,用洗滌液洗三次。
(5) 顯色 加入新鮮配制的底物液,37℃反應(yīng)一定時間后,去掉底物液,加蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。
(6) 結(jié)果判定 以陽性、陰險血清作為對照,膜片*出現(xiàn)深棕紅色斑點(diǎn)者為陽性反應(yīng),否則為陰性反應(yīng)。
elisa原理 elisa實(shí)驗(yàn) DAO