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76.0如何在實驗室中安全使用生物安全柜
76.0如何在實驗室中安全使用生物安全柜
安全使用生物安全柜
1.位置：空氣通過前面開口進(jìn)入生物安全柜的速度大約為0.45m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流，打開窗戶，送風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開關(guān)門等都可能造成影響?！ ∫虼耍瑉ui為理想的是，生物安全柜應(yīng)位于人員活動，物品流動以及可能會擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個側(cè)面要盡可能留有30cm的空間，以利用對安全柜的維護(hù)。在安全柜的上面應(yīng)留有30-35cm的空間，以便準(zhǔn)確測量空氣通過排風(fēng)過濾器的速度，并便于排風(fēng)過濾器的更換。
2.操作人員：生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護(hù)作用就可能大大地受到影響。操作人員在移動雙臂進(jìn)出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口?！ ∈趾碗p臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以便安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣"掃過"手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進(jìn)行處理。要在開始實驗之前將所有必須的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。
3.物品放置：二級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙，儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來消除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M(jìn)行實驗，以吸收可能濺出的液滴?！ ∷形锲窇?yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺邊緣的位置，并使其在操作中不會阻擋候補(bǔ)格柵。可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器，離心機(jī)等）應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋，盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺面上的實驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行?！ ∧透邏簻缇纳镂：π詮U棄物袋以及吸管盛放盤不應(yīng)放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護(hù)。
4.操作和維護(hù)：大多數(shù)生物安全柜的設(shè)計允許全天24小時工作。研究人員還發(fā)現(xiàn)，連續(xù)工作有助于控制實驗室中灰塵和顆粒的水平。向房間中排風(fēng)或通過套管接口與專門的排風(fēng)管相連接的一級A1和A2型生物安全柜，在不使用時是可以關(guān)閉的。其他如二級B1和二級B2型生物安全柜，是通過硬管安裝的，就必須始終保持空氣流動以維持房間空氣的平衡?！ ≡陂_始工作以前以及完成工作以后，應(yīng)至少讓安全柜工作5分鐘來完成"凈化"的過程，應(yīng)即應(yīng)留在將污染的空氣派出安全柜的時間?！ ∩锇踩竦乃芯S修工作應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進(jìn)行。在生物安全柜操作中出現(xiàn)的任何故障都應(yīng)該報告，并應(yīng)在再次使用之前進(jìn)行維修。
5.紫外燈：生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應(yīng)該每周進(jìn)行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。在安全柜重新認(rèn)證時，要檢查紫外線的強(qiáng)度，以確保有適當(dāng)?shù)墓獍l(fā)射量。房間中有人時一定要關(guān)閉紫外燈，以保護(hù)眼睛和皮膚，避免因不慎暴露而造成傷害。
6.明火：在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。
7.溢出：實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規(guī)則，每一位使用實驗室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。一旦在生物安全柜中發(fā)生由生物學(xué)危害的物品溢出時，應(yīng)在安全柜出于工作狀態(tài)下立即進(jìn)行清理。要使用有效的消毒劑，并在處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒/或高壓滅菌。
8.認(rèn)證：在安裝是一季每隔一定時間以后，應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對每一臺生物安全柜的運(yùn)行性能以及完整性進(jìn)行認(rèn)證，以檢查其是否符合國家及的性能標(biāo)準(zhǔn)。安全柜防護(hù)效果的評估應(yīng)該包括對安全柜的完整性，HEPA過濾器的泄漏，向下氣流的速度，正面氣流的速度，負(fù)壓/換氣次數(shù)，氣流的煙霧模式以及警報和互鎖系統(tǒng)進(jìn)行測試。
還可以選擇進(jìn)行漏電，光照度，紫外線強(qiáng)度，噪聲水平以及震動性的測試。在進(jìn)行這些測試時，檢測人員要經(jīng)過專門的培訓(xùn)，采用專門的技術(shù)和儀器設(shè)備。強(qiáng)烈建議由有資質(zhì)的專業(yè)人員來進(jìn)行測試。
9.清潔和消毒：由于剩余的培養(yǎng)基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結(jié)束時，包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清楚表面污染，并移出安全柜。 在每次使用前后，要清除生物安全柜內(nèi)表面的污染。工作臺面和內(nèi)壁要用消毒劑進(jìn)行擦拭，所用的消毒劑要能夠殺死安全柜里可能發(fā)現(xiàn)的任何微生物。在每天試驗結(jié)束時，應(yīng)擦拭生物安全柜的工作臺面，四周以及玻璃的內(nèi)外側(cè)等部位來清除表面的污染。在對目標(biāo)生物體有效時，可以采用漂白劑溶液或70%酒精來消毒。在使用如漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用無菌水再次進(jìn)行擦拭。 推薦將安全柜一直維持運(yùn)行狀態(tài)。如果要關(guān)閉的話，則應(yīng)在關(guān)機(jī)前運(yùn)行5分鐘以凈化內(nèi)部的氣體。
10.清除污染：生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。zui常用的方法是采用甲醛蒸汽熏蒸。應(yīng)該由有資質(zhì)的專業(yè)人員來清除生物安全柜的污染。
11.個體防護(hù)裝備：在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護(hù)服。在進(jìn)行一級和二級生物安全水平的操作時，可穿著普通試驗服。前面加固處理的反背式試驗隔離衣具有更好的防護(hù)效果，應(yīng)在進(jìn)行三級和四級生物安全水平（防護(hù)服型實驗室除外）的操作時使用。手套應(yīng)套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的套袖來保護(hù)研究人員的手腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡?！ ?br /> 12.警報器：可以在兩種警報器中選擇一種來裝備生物安全柜。窗式警報器只能裝在帶有滑動窗的安全柜上。發(fā)出警報時表明操作者將滑動窗移到了不當(dāng)?shù)奈恢谩Ｌ幚磉@種警報時，只要將滑動窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報器報警時，表明安全柜的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品當(dāng)即處于危險狀態(tài)。當(dāng)氣流警報響起時，應(yīng)立刻停止工作，并通知實驗室主管。生產(chǎn)商的說明手冊中將提供更詳細(xì)的資料，在生物安全柜的使用培訓(xùn)中也應(yīng)包括這一方面的內(nèi)容。
