組織經(jīng)酶解消化后游離出來,細(xì)胞的表面通常很脆,易于破裂,分離過程中要盡可能使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài),如處于梯度的屏障層上。如果細(xì)胞經(jīng)離心形成沉淀,在重懸過程中由于剪切作用對細(xì)胞可能會有不同程度的損傷。在采用漂浮法分離時,都會應(yīng)用蛋白水酶解,例如胰蛋白酶、膠原酶等。在隨后的清洗過程中這些酶未能*從游離細(xì)胞中清除,它們會對細(xì)胞繼續(xù)作用,所以有時在4℃下分離,其作用是抑制這些酶的活性。
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