我想大部分用戶都關(guān)心選擇什么樣的顯微鏡才是我真正需求的顯微鏡,現(xiàn)在我們主要爭對倒置顯微鏡來說,如果一般用戶用的樣品是在細(xì)胞培養(yǎng)板里的或者培養(yǎng)皿的(比如你問題中提到的96孔板)因為板有一定的厚度,如果這個厚度大于你放大倍數(shù)所要求的物距,物鏡無法靠近樣品,無法觀察。這個時候你就要考慮用倒置顯微鏡了,因為倒置顯微鏡的優(yōu)點在于,從上到下的順序依次是:樣品,載物臺,物鏡。這樣物鏡可以很接近樣品而不會受樣品厚度的限制。
那客戶zui關(guān)心倒置顯微鏡的哪些內(nèi)容呢!
首先講講倒置顯微鏡的主要幾個部分,也是客戶在選擇上要考慮的因素
1:光學(xué)部分:顯微鏡質(zhì)量的核心就是其光學(xué)部分,也就是目鏡和物鏡部分。對于物鏡來說,一般可以分為幾個級別。首先是消色差物鏡,使用這種物鏡,不是成像所有的地方都清晰,只有視野中央60%左右的范圍清晰,外周40%部分會存在一定的缺陷。通常我們會把觀察部分放在視野中央,所以并不影響觀察。但是如果你想要100%視野沒有缺陷的話,就要用平場消色差物鏡,相對而言,這種的價格就會高很多,一般是用在醫(yī)療和科研方面。還有就是介于兩者之間的,也就是半平場消色差物鏡。學(xué)生用的顯微鏡選擇前面兩個級別就可以了。一般的便宜點的物鏡均為普通的消色差物鏡,成交價格都在9千元左右。好點的就復(fù)消色差物鏡或是無限遠(yuǎn)消色差物鏡,成交價格在1萬多元左右。如果是三目的價格還更高幾千元。所以用戶選購目鏡就比較簡單,就是看其視野的大小,推薦用大視野的目鏡,因為大視野的目鏡相對與一般的具有更大開口,視覺效果更好。不過正常情況下選擇倒置顯微鏡客戶用三目的比較多。
2:結(jié)構(gòu)材料:比如說顯微鏡的機(jī)身結(jié)構(gòu),顯微鏡的使用壽命很長,有些可以達(dá)到10年以上,那么高質(zhì)量的零部件和嚴(yán)密的裝配就成為其使用壽命的保證。因此,應(yīng)選擇具有穩(wěn)固結(jié)實鏡架的顯微鏡,材質(zhì)選擇是合金的,可以減少變形。另外載物臺的大小也很重要,一般載物臺越大的顯微鏡價格相對會高一些,因為載物臺大一些可以放比較大的樣口,觀察的面積比較大一點,移動它樣品比較方便觀察臨床實驗室
3:光源部分:顯微鏡觀察可以有明場、暗場、偏光、相差,熒光等光源,不同功能顯微鏡分別用不同的觀察方式,而且作用也不同
明場像(BF):選用直射電子形成的像(透射束),像清晰。一般明場光源是zui普通的光源
暗場像(DF):選用散射電子形成的像(衍射束),像有畸變、分辨率低。
暗場光源很多客戶比較不明白,我在這里更加深入的說明暗場觀察針對具體暗場特性的物質(zhì):暗視野觀察(Dark field):暗視野實際是暗場照明發(fā)。它的特點和明視野不同,不直接觀察到照明的光線,而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線。因此,視場成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的象。
暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象,微塵在強(qiáng)光直射通過的情況下,人眼不能觀察,這是因為強(qiáng)光繞射造成的。若把光線斜射它,由于光的反射,微粒似乎增大了體積,為人眼可見。暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡。它的特點是不讓光束由下至上的通過被檢物體,而是將光線改變途徑,使其斜射向被檢物體,使照明光線不直接進(jìn)入物鏡,利用被檢物體表面反射或衍射光形成的明亮圖象。暗視野觀察的分辨率遠(yuǎn)高于明視野觀察,zui高達(dá)0.02—0.004偏光用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種光源。凡具有雙折射的物質(zhì),在偏光觀察下就能分辨的清楚,當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色法來進(jìn)行觀察,但有些則不可能,而必須利用偏光。一般偏光顯微鏡全家的5~8千,貴的則兩三萬,還有購買偏光顯微鏡的采用單色光,因為光的速度,折射率,和干涉現(xiàn)象由于波長的不同而有差異。一般鏡檢可使用普通光。至于相差光源前面已經(jīng)做過介紹。
熒光光源:是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像,因此熒光光源大多數(shù)還是熒光顯微鏡上用的比較多。
4:倒置顯微鏡的目數(shù):倒置顯微鏡正常客戶用三目的比較多,其實就是雙目的,單目的基本上在倒置顯微鏡上用的很少,應(yīng)該說幾乎沒有,因此很多國內(nèi)的廠家都只有生產(chǎn)雙目和三目和,一般雙目的倒置顯微鏡和三目的倒置顯微鏡價格相差在2千元左右。