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體視顯微鏡的照明方法
在體視顯微鏡中存在著兩種不同的照明方法,即臨界照明和柯勒照明。
臨界照明就是通過(guò)乳白燈泡的照明表面或場(chǎng)玻璃屏直接照明物體,照明的光錐可以通過(guò)在集光器入瞳處的孔徑光鬧而控制,照明區(qū)域的大小是通過(guò)視場(chǎng)光困來(lái)調(diào)節(jié)的(因5.6上圖)。這種照明系統(tǒng)當(dāng)集光器放在稍高或稍低的位置時(shí),顯微鏡的性能并不會(huì)發(fā)生明顯的變化,對(duì)于白乳燈或場(chǎng)玻璃表面對(duì)標(biāo)本像的擾亂,可以在不損害照明質(zhì)量的條件下通過(guò)輕微移動(dòng)集光器的聚焦旋鈕而很方便地進(jìn)行矯正。但是這種照明系統(tǒng)存在著兩個(gè)主要缺點(diǎn):①物場(chǎng)上光的強(qiáng)度不均勻;②當(dāng)使用低放大倍數(shù)時(shí)保的亮度太強(qiáng)。
另外,在現(xiàn)代體視顯微鏡中使用zui普遍的是柯勒照明法,這是把一個(gè)弱的正透鏡即聚光透鏡或一個(gè)附加集光器放在光源的前面,于是光源的像就被聚焦在集光器的后焦面上(即在孔徑光闌的平面上),附加集光器表面的像就被聚焦在標(biāo)本平面上(圖5.6下圖)。由柯勒在1893年所發(fā)明的這種照明系統(tǒng)具有很多優(yōu)點(diǎn),它與臨界照明之間的主要區(qū)別在于不是直接用燈本身作為光源,而是用在光學(xué)上制作的單色場(chǎng)作為光源。通過(guò)關(guān)閉視場(chǎng)光閑,光閉的邊緣就會(huì)成像在物體平面上,因此光闌可以開(kāi)放到剛好使物場(chǎng)被照明。由于限制了在像的形成中并不起作用的物場(chǎng)外照明區(qū)域,減少了散射光和閃光,其結(jié)果可以形成高反差的像。關(guān)閉視場(chǎng)光闌(它在臨界照明中也可以起到同樣的作用,但不能如此容易地調(diào)整)并不會(huì)影響照明光錐的孔徑。
采用柯勒照明形成的顯微鏡像可以表現(xiàn)出照明的單色光效果和對(duì)散射光的克服,雖然它的分辨力在理論上并不高于臨界照明,但是由于鮮明的反差可以清晰地看到一個(gè)較高質(zhì)量的像??吕照彰鞯牧硪粋€(gè)優(yōu)點(diǎn)是它可以使用具有密集燈絲和高亮度的低壓小燈泡,它特別適用于內(nèi)組照明。很多年來(lái)這種照明方法被廣泛地應(yīng)用于各種顯微鏡中,特別是在研究體視顯微鏡和攝影顯微鏡的各種燈室內(nèi)。
在這兩種照明系統(tǒng)中,集光器都需要一種向著光軸的調(diào)中裝置。在所有采用柯勒照明的顯微鏡中,這種調(diào)中裝置一般是安裝在集光器邊緣上的兩個(gè)調(diào)中螺旋,通過(guò)調(diào)中螺旋的調(diào)節(jié),使集光器的中心與顯微鏡的光軸重合。但是在臨界照明中,只要光源對(duì)于物鏡的照明是足夠大的,集光器的調(diào)中就不是很重要的。
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