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徠卡共聚焦顯微鏡基本原理
一、徠卡共聚焦顯微鏡
由于具有光學(xué)切片性質(zhì).徠卡共聚焦顯微鏡特別有列于牧厚物體的三維成像。它7;僅以熒光模式3。泛地應(yīng)用r各種生物樣品的成像,而只以明視野反射模式應(yīng)用1;不同形狀物體的成保。
徠卡共聚焦顯微鏡中出激光器產(chǎn);生的激光經(jīng)物鏡聚焦到樣品上,所產(chǎn)牛的反射光或熒光通過分光器后經(jīng)同鏡會聚于探測器,在激光掃描共聚熊顯微鏡小,光電倍增管(或其它)檢測器前有一個共聚焦狹縫或小孔,見聞l—1。用會聚光束心物體進(jìn)行掃描,可以產(chǎn)生相應(yīng)的圖像,通??纱嫒胗嬎銠C(jī)顯像系統(tǒng)。
徠卡共聚焦顯微鏡是掃描光鏡的種持殊的成保模式,由于通過掃描方式成您。因此比普通顯微鏡有許多優(yōu)點(diǎn)。
徠卡共聚焦顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)主要源丁其兩個主要性質(zhì):
其一圖像是以電信號的形式記錄;來的,所以可以采用各種模擬的和數(shù)字的電子技術(shù)進(jìn)行圖像處理。這些常用的圖像處理技術(shù)有:可顯示差異或變化的圖像增強(qiáng)技術(shù)(如框架平均術(shù),反差增強(qiáng)術(shù),邊緣增強(qiáng)木,因像如除術(shù),,可提高分辨率和降低本底的圖像修復(fù)技術(shù),和圖像分析技術(shù)(加持征識別.測定細(xì)胞的大小和數(shù)目)等。
其二在徠卡共聚焦顯微鏡中,物體經(jīng)精細(xì)調(diào)焦的光束照射而成像。這不僅可以使用許多新型的光學(xué)成份模式,如共聚焦成像或相差成假,而且也可能用其它成像模式以檢測入射光束而產(chǎn)生的‘些相關(guān)效應(yīng)。
當(dāng)檢測光和照射光的波長不同時,這類斤法中有一種特別重要的方法會應(yīng)運(yùn)而生。
在徠卡共聚焦顯微鏡中將引捕技術(shù)應(yīng)用于這種光學(xué)成像的優(yōu)點(diǎn)是,這種成像方法,用入射光操作,不需要選擇波長祁分析發(fā)射光,因而簡化了設(shè)計,提高了性能。檢測系統(tǒng)也因為不需成保而可以有更高的靈敏度。這對熒光顯微鏡特別有用,因為其分辨牟取決于較短納入射波長,而個是較長的熒光波。
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