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[供應(yīng)]16HBE-人支氣管上皮細(xì)胞

貨物所在地:上海上海市

更新時(shí)間:2024-04-01 16:25:27

有效期:2024年4月1日 -- 2025年4月1日

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16HBE 人支氣管上皮細(xì)胞
 

培養(yǎng)條件:

 

 

 

*培養(yǎng)基:90%DMEM高糖+10%胎牛血清

培養(yǎng)條件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

 

傳代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。

()如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。

注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造

成生長(zhǎng)不好。

 

凍存方法:

  凍存液:95%*培養(yǎng)液,5%DMSO

  儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存

 

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