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[供應(yīng)]HaCaT-HaCaT 人永生化表皮細(xì)胞

貨物所在地:上海上海市

更新時(shí)間:2024-04-01 16:25:22

有效期:2024年4月1日 -- 2025年4月1日

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HaCaT 人永生化表皮細(xì)胞

細(xì)胞株名稱:Hacat  人永生化角質(zhì)細(xì)胞
種屬:人
性別:
組織來(lái)源:皮膚
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
形態(tài)特征:上皮細(xì)胞樣 
  
*培養(yǎng)基: DMEM(內(nèi)含2mM L-glutamine)+15%胎牛血清
 
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% 
收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造
成生長(zhǎng)不好。
  
 凍存液:95%*培養(yǎng)液,5%DMSO
 儲(chǔ)存:液氮儲(chǔ)存 

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