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食物中致病微生物的鑒定是公共衛(wèi)生關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)估算，美國(guó)每年有六分之一的人會(huì)遭受食物中毒，2011年，因大腸埃希氏菌Escherichia coli O157爆發(fā)，導(dǎo)致2138人住院。由于食物中致病微生物含量少，只有經(jīng)過(guò)12~48h的富集培養(yǎng)才能達(dá)到傳統(tǒng)鑒定方法的檢測(cè)限(10⁵cfu/ml)。而在這段培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，消費(fèi)者無(wú)法被告知能否食用某種事物，導(dǎo)致致病微生物繼續(xù)傳播。因此建立一種快速鑒定致病微生物新方法迫在眉睫。

近年來(lái)表面等離子體共振成像（SPRi）被用于快速檢測(cè)細(xì)菌，這一技術(shù)基于芯片表面折射率的變化，可以在非濃縮、無(wú)標(biāo)記的情況下檢測(cè)到芯片上的探針和樣品中靶標(biāo)蛋白或細(xì)胞之間的相互作用。格勒諾布爾大學(xué)創(chuàng)新性的使用糖探針代替抗體，再利用SPRi技術(shù)在細(xì)菌生長(zhǎng)期對(duì)其進(jìn)行鑒定，能實(shí)現(xiàn)快速鑒定菌株。

圖注：含有不同糖探針的芯片?加入不同細(xì)菌?

得到特異的SPRi指紋

實(shí)驗(yàn)中首先選用7種單糖或二糖與吡咯合成7種吡咯-糖軛合物并提純，然后將合成物固定到SPRi生物芯片上形成微陣列芯片。后將微陣列芯片放入HORIBA SPRi儀器中，并加入5種濃度為10² cfu/ml的相近大腸埃希氏菌。菌株與糖探針發(fā)生相互作用，通過(guò)實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中的SPRi信號(hào)變化，該方法在10小時(shí)內(nèi)完成了濃度僅為10² cfu/ml的相近菌株E. coli O145和O157的鑒別。

這一裝置可以作為診斷工具實(shí)現(xiàn)致病細(xì)菌的快速鑒定，其靈敏度高、易操作，在未來(lái)的食品安全方面有很大的應(yīng)用潛力。

該工作以《Carbohydrates as New Probes for the Identification of Closely Related Escherichia coli Strains Using Surface Plasmon Resonance Imaging》為題，發(fā)表于《Analytical Chemistry》（掃描二維碼可直達(dá)英文原文）。

如需了解該研究中的測(cè)試方法，可識(shí)別下方二維碼進(jìn)行留言，我們的應(yīng)用專(zhuān)家將樂(lè)于為您提供解答服務(wù)。

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