QQ交談
MSN交談單增李斯特菌檢測試劑盒（熒光PCR法）
- 公司名稱：
- 更新時間：
- 所 在 地：
- 生產(chǎn)地址：
- 瀏覽次數(shù)：
- 廣州健侖生物科技有限公司
- 2017-09-14 17:40:19
- 廣州市
- 1623
【簡單介紹】
| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
【詳細說明】
單增李斯特菌檢測試劑盒（熒光PCR法）
說 明 書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：單增李斯特菌檢測試劑盒（熒光PCR法）
【貨號】
BD-Ⅰ-303
【包裝規(guī)格】
50Tests/kit
【預(yù)期用途】
本品主要用于單增李斯特菌檢測鑒定及突發(fā)公共衛(wèi)生事件的處置，還可用于單增李斯特菌的環(huán)境監(jiān)測、衛(wèi)生檢疫及感染的輔助診斷。僅供研究、不用于臨床診斷！
【檢測原理】
本試劑盒采用聚合酶鏈式擴增(PCR)及TaqMan熒光探針技術(shù),在單增李斯特菌基因序列的高度保守區(qū)域設(shè)計引物及熒光探針，通過全自動熒光PCR儀對疑似單增李斯特菌感染患者標本中的單增李斯特菌進行擴增檢測，從而實現(xiàn)對單增李斯特菌的定性檢測。
【試劑盒組成】
序號 | 組分 | 數(shù)量 | 規(guī)格 |
1 | qPCR Master Mix | 1 | 625μl/管 |
2 | 單增李斯特反應(yīng)液 | 1 | 375μl/管 |
3 | 單增李斯特陽性對照 | 1 | 50μl/管 |
4 | RNase Free H2O(陰性對照) | 1 | 100μl/管 |
【儲存條件及有效期】
-20℃避光貯存，避免反復(fù)凍融。有效期12個月（請于有效期內(nèi)使用）。
【適用儀器】
ABI PRISM®7900、ABI PRISM®7500、ABI PRISM®7300、ABI PRISM®7700、ABI PRISM®7000、MJ Opticon 、BIORAD iCycler 、Roch LightCyclerTM、Qiagen Rotor Gene等。
【樣本要求】
樣本采集后應(yīng)及時檢測，否則應(yīng)-20℃保存，避免反復(fù)凍融，使用干冰或液氮運輸。
【檢驗方法】
1.試劑準備（試劑準備區(qū)）
反應(yīng)液組份 | 加量 (μl) |
qPCR Master Mix | 12.5 |
單增李斯特反應(yīng)液 | 7.5 |
待測標本DNA | 5 |
總體積 | 25 |
2.樣本處理（樣本處理區(qū)）
2.1取200μl的待檢樣本及陰性對照樣本進行核酸提取。DNA可采用Trizol法、硅膠膜吸附法、磁珠法等微量DNA提取試劑盒提取，按相應(yīng)說明書要求進行操作。提取好的DNA應(yīng)及時用于檢測，否則應(yīng) – 20℃保存。
2.2加樣：在準備好試劑的PCR反應(yīng)管中分別加入陰、陽性質(zhì)控品、待測樣本DNA各5μl，蓋緊管蓋后，瞬時低速離心。
3.PCR擴增檢測（擴增區(qū)）
待檢PCR管轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)，按順序置于PCR儀上，編輯樣本信息，設(shè)定循環(huán)參數(shù)（請參照各類儀器的操作說明進行設(shè)置）。
步驟 | 溫度（℃） | 時間 | 循環(huán)數(shù)（次） | |
1 | 預(yù)變性 | 95 | 5分鐘 | 1 |
2 | 變性 | 95 | 10秒 | 40 |
退火、延伸及檢測熒光 | 58 | 45秒 | ||
步驟2中58℃時熒光檢測，檢測通道：FAM | ||||
*注：ABI系列熒光PCR儀不選ROX校正，淬滅基團選擇None。
4.結(jié)果分析
ABI7500熒光PCR儀:將 baseline設(shè)為3-15(根據(jù)實際情況，baseline cycler可在一定范圍內(nèi)變化),熒光閾值（threshold）設(shè)定原則以閾值線剛好超過陰性對照品擴增曲線（無規(guī)則的噪音線）的zui高點，且Ct值=40（或顯示為undet）。使用儀器配套軟件自動分析結(jié)果。
5.質(zhì)量控制
試劑盒中提供陽性質(zhì)控品、陰性對照各一個，對應(yīng)Ct值分別為Ct陽、Ct陰；如試劑質(zhì)量完好并操作正確，Ct陽< Ct陰，Ct陽<30，并呈現(xiàn)典型的S型擴增曲線，否則實驗無效，應(yīng)檢查儀器、試劑、擴增條件等方面的誤差。在每次檢測中應(yīng)設(shè)置陰陽性對照品。
6．實驗結(jié)果的判定
在實驗有效的前提下
Ct值≥38 （或undet） | 陰性結(jié)果 |
|
35≤Ct值<38 | 檢測灰區(qū)，應(yīng)重復(fù)測定兩次 | 重復(fù)測定兩次，Ct值≥38，陰性結(jié)果；其中1次Ct值<38 ，陽性結(jié)果,FAM通道陽性判斷為感染單增李斯特菌 |
Ct值<35 | 陽性結(jié)果,FAM通道陽性判斷為感染單增李斯特菌 | |
【實驗結(jié)果的解釋】
- 在所有對照都滿足要求的前提下，在35個循環(huán)之前，所有的臨床樣本的反應(yīng)擴增曲線都應(yīng)該超過閾值線，這表明擴增到足夠量的RNA，也表明了樣本質(zhì)量合格。然而，可能有些樣本會由于初始臨床樣本中的病毒數(shù)量較少而無法出現(xiàn)陽性結(jié)果。
- 在38個循環(huán)之內(nèi)，陰性質(zhì)控品和試劑空白（NTC）熒光增長曲線不應(yīng)該超過閾值線。如果任何其中任何一個的增長曲線超過了閾值線，（1）可能DNA提取試劑污染，在實驗前應(yīng)確保RNA提取試劑無誤。（2）DNA提取過程或建立反應(yīng)加樣過程發(fā)生交叉污染。應(yīng)嚴格遵照操作程序的要求進行重復(fù)實驗。
- 在30個循環(huán)之前，陽性質(zhì)控品應(yīng)出現(xiàn)陽性結(jié)果。如果沒產(chǎn)生預(yù)期的陽性結(jié)果則視為無效，應(yīng)嚴格遵照操作程序進行重復(fù)實驗。
【參考值范圍】
1.Ct值≥38（或顯示為undet），陰性結(jié)果
2.Ct值<35，陽性結(jié)果
【檢測方法的局限性】
1.樣本在收集、處理、運輸以及保存不當(dāng)時，可能出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。
2.如果反應(yīng)中存在抑制物和過量的DNA、RNA模板時也可能出現(xiàn)假陰性。
3.實驗操作的任何失誤都有可能導(dǎo)致無意義的檢測結(jié)果。
【產(chǎn)品的性能指標】
本試劑盒能檢測出相當(dāng)于103copies/ml的單增李斯特菌DNA；與非單增李斯特菌無交叉反應(yīng)。
【試劑盒使用注意事項】
本試劑盒為體外檢測試劑。操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)并具有一定經(jīng)驗。
為保證實驗結(jié)果的準確性和可靠性請使用已校準的移液器，選用進口一次性使用的PCR反應(yīng)管、離心管、tip頭等進行樣本處理及配液等操作，所有用具應(yīng)不含DNA酶和RNA酶。
實驗應(yīng)嚴格分區(qū)操作；各區(qū)物品,工作服均為,不得交叉使用。實驗后應(yīng)及時清潔工作臺以防污染。
本產(chǎn)品使用前應(yīng)在室溫充分融化，混勻并瞬時低速離心。
標本處理應(yīng)在生物安全柜中進行，以保護操作人員安全和防止對環(huán)境的污染。
每次實驗應(yīng)設(shè)置陰陽性對照品。不同批號的試劑請勿混用，在有效期內(nèi)使用試劑盒。
實驗樣品盡可能新鮮，提取過程應(yīng)嚴防RNA酶污染及操作不當(dāng)導(dǎo)致的RNA降解。
在-20℃保存的DNA樣本，加樣前應(yīng)在室溫充分融化、混勻并瞬時低速離心后使用。
分裝有反應(yīng)液的反應(yīng)管應(yīng)扣蓋或裝入密實袋內(nèi)再轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
加樣時應(yīng)使樣品*落入反應(yīng)液中，不應(yīng)有樣品粘附于管壁上，加樣后應(yīng)盡快蓋緊管蓋。
反應(yīng)液分裝時盡量避免產(chǎn)生氣泡，上機前注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊，以免物質(zhì)泄露污染儀器。
擴增完畢取出反應(yīng)管，密封在塑料袋內(nèi)，丟棄于地點。
實驗中用過的吸頭請直接打入盛有10%次氯酸鈉的廢物缸內(nèi)，并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄。
工作臺及各種實驗用物品經(jīng)常用10%次氯酸鈉、75%酒精和紫外燈進行消毒。
實時熒光PCR儀器使用前預(yù)熱30分鐘，連續(xù)進行實驗時，儀器間隔一小時以上再使用。
實時熒光PCR儀需經(jīng)常校正和清潔載樣板板孔。
本試劑盒涉及的檢測樣本應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì)，操作和處理均需符合衛(wèi)生部《微生物生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準則》和《醫(yī)療廢物管理條例》相關(guān)要求。
本司還提供以下試劑盒
JL2107820 寨卡病毒通用型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210784 登革熱病毒通用型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） 兩種規(guī)格： 24T /48T /盒
JL210785 登革病毒Ⅰ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210786登革病毒Ⅱ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210787 登革病毒Ⅲ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210788登革病毒Ⅳ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210789登革病毒Ⅰ型/Ⅲ型雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210790登革病毒Ⅱ型/Ⅳ型雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210810基孔肯雅病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210811黃熱病病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210812西尼羅病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210813登革病毒/基孔肯雅病毒雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210814黃熱病毒/西尼羅河病毒雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210815乙型腦炎病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210816森林腦炎病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210817無形體屬核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210818發(fā)熱伴血小板減少綜合癥布尼亞病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210819裂谷熱病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210112埃博拉病毒（扎伊爾型）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210113馬爾堡病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210114 NDM-1基因核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210115 腦膜炎雙球菌核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210116 尼帕病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210122腎綜合征漢灘病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210123腎綜合征漢城病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210124腎綜合征漢灘/漢城病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210125肺綜合癥漢坦病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210127血吸蟲核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210128瘧原蟲核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210129肝吸蟲核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210130鼠疫耶爾森菌核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210131炭疽桿菌核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210132布魯氏桿菌核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210133布魯氏桿菌Abortus/Melitensis/ovis分型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
JL210134轉(zhuǎn)基因大豆核酸檢測試劑盒（PCR－熒光探針法）
JL210135沃爾巴克氏體wpip型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）
二維碼掃一掃
【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【】 楊永漢
【】
【騰訊 】 2042552662
【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-103室
相關(guān)產(chǎn)品
請輸入產(chǎn)品關(guān)鍵字：
郵編：510660
聯(lián)系人：楊永漢
電話：86-020-82574011
傳真：86-020-32206070
手機：13802525278
留言：發(fā)送留言
個性化：www.jianlun45.com
網(wǎng)址：www.jianlun.com
商鋪：http://www.hbwxwy.cn/st199246/