SEKISUI甲乙型流感病毒抗原檢測(cè)試劑(快檢試劑)
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SEKISUI甲乙型流感病毒抗原檢測(cè)試劑(快檢試劑)
廣州健侖生物科技有限公司
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4、免疫組化染色步驟:
石蠟切片脫蠟至水。
3%H2O2室溫孵育5~10 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。
蒸餾水沖洗,PBS 浸泡5 分鐘,(如需采用抗原修復(fù),可在此步后進(jìn)行)。
5~10%正常山羊血清(PBS 稀釋)封閉,室溫孵育10 分鐘。傾去血清,勿洗,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2 小時(shí)或4℃過(guò)夜。
PBS 沖洗,5 分鐘×3 次。
滴加適當(dāng)比例稀釋的生物素標(biāo)記二抗(1%BSA-PBS 稀釋),37℃孵育10~30 分鐘;或滴加第二代生物素標(biāo)記二抗工作液,37℃或室溫孵育10~30 分鐘。
PBS 沖洗,5 分鐘×3 次。
滴加適當(dāng)比例稀釋的辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素(PBS 稀釋),37℃孵育10~30 分鐘;或第二代辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液,37℃或室溫孵育10~30 分鐘。
PBS 沖洗,5 分鐘×3 次。
顯色劑顯色(DAB 或AEC)。
自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,封片。
冰凍切片免疫組化染色步驟
冰凍切片4~8?m,室溫放置30 分鐘后,入4℃丙酮固定10 分鐘,PBS 洗,5 分鐘×3。用3%過(guò)氧化氫孵育5~10 分鐘,消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。
PBS 洗,5 分鐘×2。
4, immunohistochemical staining steps:
Paraffin sections dewaxed to water.
3% H2O2 incubated at room temperature for 5 to 10 minutes to eliminate endogenous peroxidase activity.
Rinse with distilled water and soak in PBS for 5 minutes. (If antigen retrieval is required, follow this step.)
5 ~ 10% normal goat serum (diluted in PBS), incubated for 10 minutes at room temperature. Decant the serum, do not wash, dropping the appropriate proportion of diluted primary antibody or a working solution, incubated for 1 to 2 hours at 37 ℃ or overnight at 4 ℃.
Wash in PBS for 5 minutes × 3 times.
(1% BSA-PBS diluted), incubated at 37 ℃ for 10-30 minutes; or the second generation of biotin labeled secondary antibody working solution, incubated at 37 ℃ or room temperature for 10 to 30 minute.
Wash in PBS for 5 minutes × 3 times.
Add streptozotocin labeled with horseradish enzyme diluted in appropriate proportion (diluted in PBS) for 10-30 minutes at 37 ° C, or streptozotocin working solution labeled with horseradish peroxidase at 10 ° C minute.
Wash in PBS for 5 minutes × 3 times.
Color developer color (DAB or AEC).
Full flushing water, counterstainer, sealing piece.
Frozen section immunohistochemical staining procedure
Frozen sections 4 ~ 8? M, at room temperature for 30 minutes, into 4 ℃ acetone fixed 10 minutes, PBS wash, 5 minutes × 3. Incubate with 3% hydrogen peroxide for 5 to 10 minutes to eliminate endogenous peroxidase activity.
Wash with PBS for 5 minutes × 2.
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