PCR核酸試劑細菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒
【簡單介紹】
【詳細說明】
PCR核酸試劑 細菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
兩管多重用于檢測和量化沙門氏菌屬,志賀氏菌屬,小腸結腸炎耶爾森氏菌,艱難梭菌,結腸彎曲桿菌/空腸彎曲菌/紅嘴鷗彎曲桿菌,產(chǎn)vero毒素大腸桿菌和內部對照。
Two tube multiplex for detection AND quantification of Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Clostridium difficile, Campylobacter coli/jejuni/lari, VTEC and internal control.
PCR核酸試劑 細菌性腸胃炎菌屬9聯(lián)PCR熒光檢測試劑盒
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(三)葡聚糖凝膠G-50柱層析法
除游離熒光素可用2×46cm柱層析法,詳細方法參閱第二章。加入熒光抗體15~18ml(按床體積的5%~10%加樣),使其緩慢滲入柱內,待即將全部入柱時,加入PBS少許,關閉下口,停留30~40min ,使游離熒光充分進入細篩孔中,然后再接通洗脫瓶開始滴入洗脫液。加入洗脫液一定量后,熒光抗體即向下移行,逐漸與存留于上端的游離熒光素之間拉開明顯的界線,隨著大量洗脫液的不斷加入,二者分離距離越來越大,熒光抗體zui先流出,分前、中、后三部分收集,測F/P比值,合格者合并,濃縮,分裝。洗脫液用20%磺基水楊酸測定蛋白(發(fā)生沉淀反應),繼續(xù)洗脫,游離熒光素則相繼被洗脫下來,至洗脫液中無蛋白和熒光素后,此層析柱即可再用。
若用以除去熒光抗體中的游離熒光素和硫酸銨等鹽類,可先在過柱前透析一夜,否則,NH4+太濃,在蛋白未*洗脫時即出現(xiàn)NH4+,因而影響提純與回收蛋白,一般待洗脫液出現(xiàn)蛋白時,即進行收集,之后出現(xiàn)SO4++(用1%BaCl2檢查發(fā)生白色沉淀)。zui后是NH4+,(用納氏試劑檢查呈黃棕色沉淀),待洗脫液無SO4++及NH4+后可再用。
如僅用小量熒光抗體,可用1×20cm的柱層析柱,取2g Sephadex G-50裝柱,即可過濾2~3.5ml熒光抗體。
(四)DEAE纖維素柱層析法
標記過多或過少熒光素的抗體分子可用DEAE-纖維素柱層析法除去。方法如下: DEAE-纖維素柱的裝柱,洗脫、再生方法等與提純IgG方法相同。裝柱所需DEAE-纖維素量以干重每克交換20~50mg標記蛋白量為宜 。
常用梯度洗脫法如下:
(1)層析柱用0.01mol/L、pH7.2PB平衡,標記物上柱后,先用0.01mol/L、pH7.2PB洗脫,洗出無色或淡綠色液體,洗脫液量(根據(jù)床體積大小每梯度乘3),然后依下列各種離子強度洗脫液, 分別洗脫和收集:
0.01mol/L、pH7.2PBS(0.05mol/L NaCl)……洗脫部分1。
0.01mol/L、pH7.2PBS(0.01mol/L NaCl)……洗脫部分2。
0.01mol/L、pH7.2PBS(0.02mol/L NaCl)……洗脫部分3。
將此三部分收集液(每管5ml)分別測定其F/P比值,0.05mol/L NaCl pH7.2PB洗脫液280nm光密度高峰管合并,濃縮保存?zhèn)溆谩R蜻@部分非特異性染色熒光zui少,是比較好的熒光抗體。其他兩部分可以廢棄。
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