一步法RT-PCR試劑盒
【簡單介紹】
品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一周 |
---|
英文名:QIAGEN OneStep RT-PCR Kit
中文名:一步法RT-PCR試劑盒
用于靈敏、特異性的一步法RT-PCR
快速方便的單管反應(yīng)
適合各種RNA模板,無需優(yōu)化反應(yīng)條件
*的酶組合,確保反應(yīng)的高特異性和高靈敏度
經(jīng)優(yōu)化的緩沖體系確保了高效的逆轉(zhuǎn)錄和擴增過程
【詳細說明】
一步法RT-PCR試劑盒
一步法RT-PCR試劑盒包含Omniscript逆轉(zhuǎn)錄酶和Sensiscript逆轉(zhuǎn)錄酶的混合物、HotStarTaq DNA Polymerase、QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer、dNTP混合液和Q-Solution。Q-Solution是一種新型的輔助劑,有助于實現(xiàn)“困難”模板(如:高GC含量的模板)的高效擴增。簡單的單管反應(yīng)體系構(gòu)建和優(yōu)化的試劑盒組分確保了結(jié)果成功且靈敏度高。
特點 | 參數(shù) |
應(yīng)用 | Gene-expression analysis, virus detection |
酶活 | Reverse transcription, 5' -> 3' exonuclease activity |
預(yù)混液 | No |
反應(yīng)類型 | One-step RT-PCR |
real-time或終點法PCR | Endpoint |
樣本/目標類型 | RNA template |
單一或多重 | Single |
有/無熱啟動酶 | With hotstart |
性能
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit提供方便的規(guī)格,可使用RNA模板進行高靈敏度和特異性的RT-PCR。試劑盒中包含優(yōu)化的組分,可在同一反應(yīng)混合液中進行逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增,完成"一步式"反應(yīng)。*的酶組合和專門研發(fā)的反應(yīng)緩沖液確保在一個管中進行高效、高特異性的逆轉(zhuǎn)錄和PCR,無需優(yōu)化。試劑盒提供的新型的、雙陽離子PCR緩沖液確保在寬退火溫度范圍內(nèi)得到高產(chǎn)量的特異性PCR產(chǎn)物。使用Q-Solution可提高不理想的RT-PCR的表現(xiàn),這種*的輔助劑可幫助逆轉(zhuǎn)錄并高效擴增具有高GC含量和復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的模板。
原理
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit可對多種RNA模板進行簡單、靈敏的一步式RT-PCR。
QIAGEN OneStep RT-PCR Enzyme Mix含有為逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)特別設(shè)計的酶。*組合的Omniscript和Sensiscrip逆轉(zhuǎn)錄酶對RNA模板有高度親和性,確保RNA逆轉(zhuǎn)錄的靈敏度達到1 pg到2 µg。逆轉(zhuǎn)錄完成后,升溫至95°C,15分鐘,活化HotStarTaq DNA Polymerase同時使逆轉(zhuǎn)錄酶失活。這種方法可減少引物二聚體等非特異性擴增產(chǎn)物的生成,并減少背景的影響,確保RT-PCR的高靈敏度和可重復(fù)性。
退火溫度范圍寬
引物的退火溫度取決于堿基對的組成(如A、T、G、C核苷酸的比例)、引物的濃度和反應(yīng)的離子環(huán)境。QIAGEN PCR Buffers含有K+和NH4+,使用該緩沖液可在很寬的溫度范圍內(nèi)增加特異性PCR產(chǎn)物的產(chǎn)量。其原理是破壞非特異性結(jié)合的引物對,提供更加可靠的反應(yīng)環(huán)境,減少繁瑣的溫度優(yōu)化過程。相反,如使用僅含K+的PCR或一步式RT-PCR緩沖液,PCR退火溫度的范圍較窄,可靠性較差。
QIAGEN OneStep RT-PCR Buffer專為提高逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增的效率而設(shè)計。該緩沖液含有新型輔助劑,可防止逆轉(zhuǎn)錄酶對PCR擴增的抑制,而這是一步式RT-PCR中常見的問題。該緩沖液確保在較大的溫度范圍和Mg2+濃度范圍內(nèi),引物與模板特異性結(jié)合,可對多種RNA模板進行高效的RT-PCR擴增。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有Q-Solution,這是可修飾核酸熔解行為的新型輔助劑。Q-Solution可促進高GC含量或含較多二級結(jié)構(gòu)的模板的逆轉(zhuǎn)錄和擴增。 使用Q-Solution可簡化復(fù)雜模板RT-PCR的優(yōu)化過程。QIAGEN OneStep RT-PCR Kit含有您所需的所有試劑,可進行快速、簡便的RT-PCR,用于多種靈敏的應(yīng)用(見表)。
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit 組分 | 特點 |
---|---|
HotStarTaq DNA Polymerase | 高度特異性產(chǎn)物 |
Sensiscript and Omniscript Reverse Transcriptases | RNA初始量的范圍大 (1 pg–2 µg) 高靈敏度 |
OneStep RT-PCR Buffer | 無需優(yōu)化 反轉(zhuǎn)錄酶不會抑制PCR 抑制RNases |
Q-Solution | 促進GC含量高的模板的 |
操作流程
使用QIAGEN OneStep RT-PCR Kit可快速、簡單的進行RT-PCR反應(yīng)體系構(gòu)建。無論是何種應(yīng)用,即無論是病毒檢測、分子診斷研究還是基因表達,您只需將所有試劑在一個離心管中混合即可開始PCR擴增。反應(yīng)混合液含有逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)所需的所有試劑,無需添加其他試劑即可開始反應(yīng)(參見下表)。
應(yīng)用
QIAGEN OneStep RT-PCR Kit適用于RT-PCR分析,包括:
- 病毒檢測
- 單細胞RT-PCR
- 基因表達分析
【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
手機了解:①③⑧0②⑤②⑤②⑦⑧ 楊永漢
【企鵝號】 712982226
【公司地址】 廣州清華科技園創(chuàng)新基地番禺石樓鎮(zhèn)創(chuàng)啟路63號二期2幢101-103室
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