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呢種溫度會導(dǎo)致大量嘅單鋪同雙股斷裂。-70EC可能系枕住儲存嘅zui佳選擇。對于DNA嘅枕住儲存,zui好系高EDTA(>10公厘)嘅情況下,喺pH8.5下,喺高鹽(>1米)中儲存。喺鼆中用溴化乙錠喺5EC條件下將DNA儲存喺活性CSCL中效果良好。年年每200kb嘅DNA中約莫有一個磷酸二酯斷裂。λDNA喺噬菌體中嘅儲存優(yōu)于純DNA?!綝avis,R.W.、D.Botstein同J.R.Roth,基因工程手冊放:高級細(xì)菌遺傳學(xué)】。冷泉港實驗室,冷泉港,紐約呀,一九八零年。]

B.凈化。

從核酸溶液中抹得甩蛋白質(zhì):

1。用蛋白水解酶處理,如蛋白酶、蛋白酶K。

2。苯酚提取物。純化DNA簡單嘅方法系用苯酚或者苯酚:lv仿跟住仿提取。苯酚令蛋白質(zhì)變性,后用仿萃取除去微量苯酚。

三。CSCL/溴化乙錠密度梯度

c.定量。

1。分光光度計。對于DNA嘅純?nèi)芤海唵螁糠椒ㄏ底x取260 nm處嘅吸光度,其中1 cm路徑長度中嘅1嘅OD=50μg/ml(對鏈DNA),40μg/ml(單鏈DNA同RNA),20-33μg/ml(寡核苷酸)。260納米同280納米嘅吸光度過可以預(yù)溶液嘅純度。純DNA同RNA溶液嘅OD260/OD280值勒分別為1.8同2.0。呢種方法對少量嘅DNA或者RNA(<1μg/ml)無效。

何種溫致大嘅單鋪同雙股斷。二70EC可系枕居儲嘅*選。于DNA嘅枕住積,系高EDTA(>十公厘)嘅狀下,喺pH8.五下,喺高鹽(> 1米)中貯。喺鼆中以溴化乙錠喺5EC也下DNA儲喺活性CSCL中效良。年年每200kb嘅DNA中經(jīng)有一磷酸二酯斷。λDNA喺噬菌體中嘅儲有純DNA?!綝avis,R.W.、心.Botstein同。.R.Roth,以工密置:長細(xì)菌遺傳學(xué)】。冷泉港實驗室,冷泉港,紐約也,一九八零年。]
?.凈。
自核酸溶液中拭拂蛋白質(zhì):
一。以白渾水解酶處,如蛋白酶、蛋白酶《。
二。苯酚提取物?;疍NA簡嘅法系以苯酚或苯酚:lv枋與住陪取。苯酚令蛋白質(zhì)變性,后以仿萃取除微量苯酚。
三。CSCL溴化乙錠梯度疏。
。.定量。
一。分光光度計。于DNA嘅純?nèi)芤海唵糠ㄏ底x取260 nm處嘅吸光度,其一cm徑長中嘅1嘅OD =五十μg / ml(謂執(zhí)DNA),四十μg / ml(單鏈DNA同RNA),20-33μg / ml(寡核苷酸)。260米同280米嘅吸光度可預(yù)溶液嘅純度。純DNA同RNA溶液嘅OD260 / OD280直勒分為。.八同!.。。邪術(shù)謂少嘅DNA或RNA(< 1μg / ml)效。

    
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