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ASFV檢測非洲豬瘟病毒核酸檢測方案

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  • 廣州健侖生物科技有限公司
  • 2019-05-06 15:03:10
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ASFV非洲豬瘟病毒核酸檢測方案

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ICU患者病情危重,且存在無法使用抗菌藥物治愈的感染,此背景加快了預防性用藥的發(fā)展腳步。細菌噬菌體應用的潛在適應癥較為廣泛,在不久的將來可能以霧化吸入的方式應用于銅綠假單胞菌引起的VAP患者治療中。作為抗菌藥物替代治療的單克隆抗體,不但可以用于早期金葡菌所致VAP的搶先治療(尤其是存在創(chuàng)傷及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的高危患者),同時也可用于ICU長期住院患者銅綠假單胞菌所致HAP/VAP的治療,甚至可以作為ICU中由多重耐藥菌引起嚴重感染患者的輔助調(diào)節(jié)治療。
在實驗中,常常需要利用噬菌體裂解生長的特點,培養(yǎng)獲得大量的噬菌體顆粒,并提取噬菌體基因組DNA來開展進一步的工作,下面是常用的噬菌體增殖及基因組DNA的提取方法。
一、噬菌體粗制顆粒的提取
(1)挑宿主菌接種于100ml液體LB培養(yǎng)基中,37°C振蕩培養(yǎng)至對數(shù)生長期早期。
(2)按0.1-0.01的感染復數(shù)(MOI)將噬菌體接種到對數(shù)生長期的菌液,37°C繼續(xù)振蕩培養(yǎng)過夜。
(3)在培養(yǎng)物中加入DNase I及RNase A至終濃度各為1μg/ml,37°C振蕩30min。

    
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