裂谷熱病毒IGG抗體檢測(cè)試劑盒(ELISA方法)
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裂谷熱病毒IGG抗體檢測(cè)試劑盒(ELISA方法)
廣州健侖生物科技有限公司
依流行病學(xué)資料和臨床表現(xiàn)可作初步診斷。依病毒分離(取患者病初3天的血清接種于小白鼠),或雙份血清特異抗體效價(jià)呈上升則可確診。急性裂谷熱可采用不同方法進(jìn)行診斷,在發(fā)病早期階段或在尸體解剖組織中,可檢出此種病毒。諸如酶聯(lián)免疫分析一類(lèi)的血液檢測(cè)(“ELISA”或“EIA”酶標(biāo)法),可證實(shí)存在特異性免疫球蛋白M(IgM)病毒抗體。采用各種不同方法,包括病毒分離(在細(xì)胞培養(yǎng)或接種過(guò)的動(dòng)物身上)、抗原檢測(cè)試驗(yàn)和擴(kuò)增核糖核酸基因組(RT-PCR),在發(fā)病早期階段或在尸體解剖組織中,均可檢出此種病毒。
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Red同源重組系統(tǒng)pKD46質(zhì)粒圖譜和序列
質(zhì)粒類(lèi)型:Red同源重組基因敲除載體
克隆方法:多克隆位點(diǎn),限制性?xún)?nèi)切酶
拷貝數(shù):低拷貝
載體大?。?329 bp(GenBank進(jìn)入號(hào):AY048746)
載體抗性:Ampicillin (氨芐青霉素)
備注:30°C培養(yǎng)
與同源重組基因敲除相關(guān)的3個(gè)酶:
1、Exo蛋白
Exo蛋白是一種核酸外切酶,單亞基的分子量為24 kD,Exo蛋白的活性形式是一種環(huán)狀三聚物分子,中間有一中空的通道,通道的一端可容納雙鏈DNA分子,另一端只可容納單鏈DNA。Exo蛋白可結(jié)合在雙鏈DNA的末端,從DNA雙鏈的5’端向3’端降解DNA,使DNA分子形成3’粘性末端。
2、Beta蛋白
Beta蛋白在Red同源重組中起著決定性作用,具有介導(dǎo)互補(bǔ)單鏈DNA退火的功能,是一種退火蛋白,單亞基的分子量為25.8 kD。在溶液中,Beta蛋白自發(fā)地形成環(huán)狀結(jié)構(gòu),緊緊地結(jié)合在單鏈DNA的3’突出端,防止DNA被單鏈核酸酶降解,并介導(dǎo)互補(bǔ)單鏈DNA的退火。雙鏈DNA退火完成后,Beta蛋白從DNA雙鏈上解離下來(lái)。
3、Gam蛋白
Gam蛋白為16kD的多肽分子,可與RecBCD核酸外切酶結(jié)合,抑制其對(duì)外源DNA的降解作用,防止外源DNA 進(jìn)入細(xì)胞后被宿主降解。
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