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JL8102-發(fā)熱性抗原抗體診斷試劑
【產(chǎn)品簡介】
【詳細(xì)說明】
發(fā)熱性抗原抗體診斷試劑
熱原的致熱量因菌種而異,如革蘭陰性桿菌致熱能力zui強;由于注射途徑不同,引起發(fā)熱的程度也有所差異,在科研中熱原的研究對患者存在巨大隱患可回避風(fēng)險。
JL211.牛布魯氏桿菌檢測試劑盒1x5mL
JL212.羊布魯氏桿菌檢測試劑盒1x5mL
JL213.豬布魯氏桿菌檢測試劑盒1x5mL
JL214.變形桿菌屬X19菌株O抗原(OX19)檢測試劑盒1x5mL
JL215.變形桿菌屬X2菌株O抗原(OX2)檢測試劑盒1x5mL
JL216.變形桿菌屬XK菌株O抗原(OXK)檢測試劑盒1x5mL
JL217.甲型副傷寒沙門氏菌H抗原(a-H)檢測試劑盒1x5mL
JL218.甲型副傷寒沙門氏菌O抗原(b-H)檢測試劑盒1x5mL
JL219.乙型副傷寒沙門氏菌H抗原(b-H)檢測試劑盒1x5mL
JL220.乙型副傷寒沙門氏菌O抗原(1,4,5,12-O)檢測試劑盒1x5mL
JL221.丙型副傷寒沙門氏菌H抗原(c-H)檢測試劑盒1x5mL
JL222.丙型副傷寒沙門氏菌O抗原(6,7-O)檢測試劑盒1x5mL
JL223.傷寒桿菌H抗原(d-H)檢測試劑盒1x5mL
JL224.傷寒桿菌O抗原(9,12-O)檢測試劑盒1x5mL
(1)凝集素陰性質(zhì)控液 1x1mL
(2)布氏桿菌陽性質(zhì)控液1x1mL
(3)變形桿菌陽性質(zhì)控液1x1mL
(4)沙門氏菌陽性質(zhì)控液1x1mL
原理
診斷菌液由滅活細(xì)菌標(biāo)準(zhǔn)化懸液組成,供人血清相應(yīng)凝集素的半定量凝集反應(yīng)試驗用(玻片法或試管法)。這些血清中的凝集素為感染導(dǎo)致發(fā)熱的細(xì)菌(布魯氏菌、沙門氏菌和某些立克次氏體1,2 )時產(chǎn)生的抗體。通過檢測細(xì)菌抗原-細(xì)胞壁抗原,藍(lán)色;鞭毛抗原,紅色-與待測樣品的反應(yīng)來分析結(jié)果,出現(xiàn)可見凝集的樣本即為對應(yīng)抗體陽性。
試劑組成
抗原 細(xì)菌抗原 。穩(wěn)定的滅活細(xì)菌緩沖溶液懸液。陽性質(zhì)控 布魯氏菌、沙門氏菌、變形桿菌 。含有相應(yīng)抗體的動物血清。
陰性質(zhì)控 凝集素- 陰性 。無反應(yīng)性的動物血清。
注意:試劑中含有 0.95g/L 的*,避免接觸皮膚或粘膜。
試劑的準(zhǔn)備
抗原與質(zhì)控品為即用型。
樣本
樣本為新鮮清澈的血清。
血清分離后可在 2-8℃下可以保存 1 周,在-20℃下可保存更長
時間。
需要但未提供的 材料
- 玻璃或白色檢驗卡。
- 一次性攪拌棒。
- 試管(12×100mm)
- 自動移液管。
- 機械搖床,可調(diào)節(jié)。
- 恒溫槽(30℃-50℃)。
實驗步驟
一、定性試驗
1. 將試劑和樣本置于室溫下。
2. 輕輕重懸試劑瓶中的抗原。用滴管吹吸數(shù)次*混勻。
3. 在檢測卡圈內(nèi)滴50μL 待測血清,檢測布魯氏菌抗體時20μL
即可(注釋 1 和注釋 2)。另外滴 1 滴陽性對照血清和 1 滴
陰性對照血清。
4. 在待測血清樣本旁再滴 1 滴充分混勻的細(xì)菌懸液。
5. 用一次性攪拌棒混合懸液和待測樣本,每組混合液均使用單
獨的攪拌棒。
6. 手動或用機械搖床(100r.p.m.)輕輕晃動 1 分鐘。
7. 立即于適當(dāng)?shù)墓庠聪掠^察凝集度。
結(jié)果讀?。?/span>
陰性結(jié)果:和陰性對照一樣的平滑懸液,沒有可見凝集。
陽性結(jié)果:肉眼可見的任何程度的凝集。
二、半定量試驗
1. 檢驗卡的圓圈內(nèi)分別滴 80μL、40μL、20μL、10μL 和 5μL
同一待測樣本。
2. 按定性試驗方法中的步驟4-步驟7檢測每個稀釋度的樣本。
結(jié)果讀?。?/span>
同定性試驗。樣本凝集效價按出現(xiàn)凝集的zui高稀釋度計算。
三、試管凝集試驗
1. 用鹽水作為稀釋劑,按下表方法為每種抗原檢測準(zhǔn)備一系
列倍比稀釋樣本。
2. 按順序向每個試管加 1 滴重懸好的懸液。血清的zui終稀釋
度應(yīng)為 1:20,1:40,1:80,1:160,1:320,1:640。
3. 37℃下孵育 24 小時。(注釋 4)。
4. 肉眼檢查凝集。
結(jié)果讀?。?/span>
首先讀取對照結(jié)果。檢查管底凝集狀態(tài),然后輕輕搖動試管判定結(jié)果。陰性結(jié)果:陰性反應(yīng)和懸浮對照管沒有可見凝集。輕彈懸浮對照管,產(chǎn)生典型漩渦。陽性結(jié)果:不同程度的部分或*凝集,與上清液分離。以能見到凝集的zui高稀釋度為凝集效價。比此稀釋度高的下一濃度稀釋液應(yīng)為陰性。
質(zhì)量控制
陽性和陰性血清及懸浮質(zhì)控管應(yīng)每日試驗以驗證系統(tǒng)的有效性。
參考 值
沙門氏菌和布魯氏菌:細(xì)胞壁抗原和布魯氏菌抗原凝集效價高于 1/80,鞭毛抗原凝集效價高于 1/160 表明近期感染。變形桿菌:小于 1/160 的凝集效價應(yīng)認(rèn)定為有意義。
單獨的陽性結(jié)果臨床意義小,幾天分別采取的連續(xù)血清樣本凝集效價出現(xiàn)上升或減小更具有臨床意義。
臨床 意義
發(fā)熱性抗原是一個術(shù)語,它已被*為指代能夠代表許多感染人的病原微生物的細(xì)菌懸浮液,包括一些細(xì)菌感染病(布魯氏菌病、沙門氏菌病和某些立克次體病),都伴隨著宿主發(fā)熱。確認(rèn)
傳染病病原的方法是分離鑒定病原體。但是培養(yǎng)技術(shù)可能難以應(yīng)用,所以發(fā)熱病例血清學(xué)試驗對感染期間患者血清中產(chǎn)生抗體的檢測變得十分重要(間接診斷方法)。
檢測發(fā)熱性抗原具有很高的診斷價值,它的排除或檢測能夠在試探性診斷中支持或移除基于病例和臨床癥狀的疑似病例。
分析性能
- 沒有該試劑的敏感性標(biāo)準(zhǔn)參考材料。因此,健侖公司依據(jù)有質(zhì)量保證的特異性抗血清和實際產(chǎn)品調(diào)整該產(chǎn)品的敏感性。
- 前帶效應(yīng):血清含有高滴度抗體時可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。這樣樣本的稀釋液將得出陽性結(jié)果。
- 該試劑得到的結(jié)果與參考試劑相比沒有顯著差異。根據(jù)要求我們將提供比對試驗詳情。
- 血紅蛋白(<10g/L),膽紅素(小于 20mg/dL),脂血(<10g/L)和類風(fēng)濕因子(<100IU/mL)不會產(chǎn)生干擾。
方法局限性
- 在疾病早期和免疫缺陷病例中可能出現(xiàn)生物學(xué)性的假陰性反應(yīng)。
- 經(jīng)抗生素治療的傷寒患者可能出現(xiàn)假陰性細(xì)胞壁(O 抗原)
測試結(jié)果。
- 在感染一些弧菌(彎曲桿菌)、巴氏桿菌、變形桿菌 OX19和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(血清型 9)的一些菌株的病例中布魯氏菌抗原可能出現(xiàn)假陽(交叉反應(yīng)),接種過霍亂弧菌
的病人也會出現(xiàn)類似的假陽性。
注釋
1. 決不能使用本試劑檢測慢性布魯氏菌病。應(yīng)使用孟加拉紅培養(yǎng)基和試管凝集試驗檢測樣品。
2. 在一些發(fā)熱性疾病高發(fā)地區(qū),推薦在試驗前用鹽水(0.95%)按 1:4 稀釋樣本。
3. zui終稀釋度大約分別為 1:20,1:40,1:80,1:160 和 1:320。
4. 可選孵育條件:細(xì)胞壁抗原(O)和變形桿菌抗原于 48-50℃
孵育 4 小時。
鞭毛抗原(H)于 48-50℃孵育 2 小時。
誤差來源
- 使用超過保質(zhì)期的抗原可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
- 細(xì)菌污染抗原、樣品或鹽溶液,或懸液遭冷凍可能導(dǎo)致假陽
性結(jié)果。
參考文獻(xiàn)
1. Felix, A. Trans. Roy. Soc. Trop. Med. Hyg. 37: 321 (1944).
2. Joint FAO/WHO Expert Committee on Brucellosis. Wld. Hlth. Org.
Tech. Rep. Ser. 148: 1 (1958).
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