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熒光顯微鏡注意事項

2021-7-12 閱讀(1378)

(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
(2)應(yīng)在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開始觀察標(biāo)本。
(3)防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應(yīng)戴上。
(4)檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,最多不得超過2~3h。
(5)熒光顯微鏡光源壽命有限,標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。
(6)標(biāo)本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。長時間的激發(fā)光照射標(biāo)本,會使得熒光衰減和消失現(xiàn)象,故應(yīng)盡可能縮短照射時間。暫時不觀察時可用擋光板遮蓋激發(fā)光。
(7)標(biāo)本觀察時候應(yīng)采用無熒光油,應(yīng)避免眼睛直視紫外光源。
(8)電源應(yīng)安裝穩(wěn)壓器,電壓不穩(wěn)會降低熒光燈的壽命。
熒光顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別
熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:
1.照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上;
2.光源為紫外光,波長較短,分辨力高于普通顯微鏡;
3.有兩個特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護人目。
熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。


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