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首先考慮膜與試劑的化學(xué)兼容性,是水溶液還是有機(jī)試劑。過(guò)濾器裝置必須和樣品的化學(xué)性質(zhì)全部相容。一些過(guò)濾膜含有可能對(duì)一些應(yīng)用造成干擾的無(wú) 毒的潤(rùn)濕劑。另一些濾膜可能結(jié)合蛋白質(zhì)或其它大分子,從而導(dǎo)致過(guò)濾器過(guò)早堵塞或高價(jià)值 樣品的損失。因此,了解樣品性質(zhì)以及濾膜對(duì)與之接觸的溶液的潛在影響是非常重要的。
微孔濾膜可以按照材質(zhì)進(jìn)行分類:
NYLON:尼龍膜 - 水性生物學(xué)溶液、醇類溶液和非水 HPLC/GC 溶劑,DMSO
PES: 聚醚砜膜 - 過(guò)濾水性溶液,培養(yǎng)基,藥物溶液和混合物
CA: 醋酸纖維素 - 過(guò)濾緩沖液、水性試劑和溶液
SFCA:無(wú)表面活性劑的醋酸纖維素膜-免疫學(xué)樣品和生物液體
MCE:混合纖維素 - 在水性溶液或空氣中截留顆粒并捕獲細(xì)胞
PTFE: 聚四氟乙烯 - 去除溶劑和氣體中的顆粒
PVDF: 液體除菌過(guò)濾和生物制品過(guò)濾
非常適合過(guò)濾水性生物學(xué)溶液、醇類溶液和非水 HPLC/GC 溶劑。本質(zhì)上是親 水性的,推薦用于對(duì)可提取物含量要求非常低的應(yīng)用,因?yàn)樗鼈儾缓魏螡?rùn)濕劑、清潔劑或 表面活性劑。尼龍膜的耐化學(xué)性能較強(qiáng),適于過(guò)濾腐蝕性較大的溶液,例如醇類和 DMSO。但是,和硝酸纖維素膜一樣,尼龍膜結(jié)合蛋白質(zhì)和其它大分子的能力強(qiáng)于醋酸纖維素膜或聚 醚砜膜。耐堿不耐酸。
PES 聚醚砜膜
強(qiáng)烈推薦用于過(guò)濾細(xì)胞培養(yǎng)基。濾膜具有zui低的蛋白結(jié)合能力、超低的浸出物 含量以及高流速,是過(guò)濾培養(yǎng)基的di一選。PES 膜的流速也高于纖維素或尼龍膜。
適于過(guò)濾緩沖液、水性試劑和溶液,包括 EIA 和 ELISA 樣品。濾膜具有 低蛋白結(jié)合能力及浸出物含量,非常適合過(guò)濾緩沖液。
常用于免疫學(xué)樣品和生物液體。濾膜具有低蛋白結(jié)合 能力、比標(biāo)準(zhǔn) CA 濾膜更低的浸出物含量,可用于過(guò)濾細(xì)胞培養(yǎng)液體和細(xì)胞溶液
具有高度的非特異性吸附性能,適用于許多常用的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。親水性, 對(duì)稱的結(jié)構(gòu)使其能夠?qū)崿F(xiàn)高流速,還能與水性溶液(pH 4 至 8)、碳?xì)浠衔镆约捌渌麕追N 有機(jī)溶劑相容
本質(zhì)上是疏水性的,適于過(guò)濾氣體,包括增濕的空氣。特氟龍膜的耐化 學(xué)性很好,這使其非常適于過(guò)濾其它濾膜不能過(guò)濾的溶劑或其它腐蝕性化學(xué)品,是溶劑和腐 蝕性酸堿的理想選擇。由于其疏水性,特氟龍膜在過(guò)濾水性溶液以前必須用溶劑(例如乙醇) 預(yù)先潤(rùn)濕。
能夠耐受 pH 2-10 的溶液,耐有機(jī)溶劑性能較好,具有良好的抗腐蝕、 耐氧化性能和耐熱性能,常用于液體除菌過(guò)濾和生物制品過(guò)濾。不能耐受丙酮, DMSO, THFDMF,二氯甲烷,氯仿等。
孔徑通常由您的應(yīng)用或使用目的來(lái)決定。支原體可以用 0.1μM 孔過(guò)濾器去除。大多數(shù)培養(yǎng) 基、緩沖溶液、生物液和氣體的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室除菌通常采用 0.2 或 0.22μM 孔過(guò)濾器完成。溶 液和溶劑的澄清和預(yù)過(guò)濾常用 0.45μM 或更大孔徑的過(guò)濾膜操作。為改進(jìn)過(guò)濾器性能而進(jìn) 行的預(yù)過(guò)濾也可用單獨(dú)購(gòu)買的玻璃纖維預(yù)過(guò)濾器完成。
第三步:過(guò)濾的液體量
13mm 過(guò)濾 2-10ml
25mm 過(guò)濾 10-100ml(預(yù)過(guò)濾zui高可達(dá) 200ml)
50mm 過(guò)濾 0.2-5L
過(guò)濾的實(shí)際體積際取決于溶液本身以及它堵塞膜的速度。不含大量顆?;虼罅康鞍踪|(zhì)的相對(duì) 清澈的溶液會(huì)更容易過(guò)濾,因此允許更多的體積有效通過(guò)膜。另一方面,高顆粒數(shù)的溶液可 能在通過(guò)幾毫升后就堵塞了膜。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)基,血清或蛋白質(zhì)的數(shù)量會(huì)對(duì)流速和過(guò)濾量產(chǎn) 生影響。過(guò)濾器的容量(150、250、500、1000 毫升)是對(duì)平均可過(guò)濾的液體量的一般指導(dǎo)??梢酝ㄟ^(guò)預(yù)過(guò)濾或高速離心來(lái)減少顆粒。