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恒遠(yuǎn)教您:如何巧妙保存血清標(biāo)本?
閱讀:3049 發(fā)布時(shí)間:2019-3-11
ELISA實(shí)驗(yàn)有妙招,如何巧妙保存血清標(biāo)本?血清是較為常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣本,對(duì)于血清保存好
才是關(guān)鍵,因?yàn)檠灞4嬷苯雨P(guān)系到后面elisa實(shí)驗(yàn)的成功與否,下面緊隨我們金益柏的操作人
員一起來(lái)看看.
如何巧妙保存血清樣本:
1.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶
可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶
本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。
2.血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA如為有菌操作,則建
議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。
3.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械
剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦
應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,反復(fù)顛倒混勻即可。
4.要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過(guò)氧化物的活性,因此
,在以HRP為標(biāo)記酶的測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過(guò)程中吸
附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
5.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。
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