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海藻糖在生物制品中的應(yīng)用及檢測(cè)方法
閱讀:366 發(fā)布時(shí)間:2024-9-4海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個(gè)葡萄糖分子組成的一個(gè)非還原性雙糖,分子式為C12H22O11。海藻糖結(jié)構(gòu)式為α-D-吡喃葡糖基~α-D-吡喃葡糖苷,經(jīng)常以二水化合物存在,分子式為C12H22O11·2H2O。
海藻糖結(jié)構(gòu)式
海藻糖是一種典型應(yīng)激代謝物,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成特殊的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。
海藻糖在生物制品中的應(yīng)用
1.凍干保護(hù)劑
在生物制品的凍干過程中,海藻糖作為保護(hù)劑被廣泛應(yīng)用。凍干保護(hù)機(jī)制主要包括水替代假說(shuō)和玻璃態(tài)假說(shuō),這兩種假說(shuō)都基于藥物在凍結(jié)過程中發(fā)生部分或全部的玻璃化。海藻糖因其高玻璃化轉(zhuǎn)變溫度(120℃)和低結(jié)晶率,能夠在冷凍過程中形成穩(wěn)定的玻璃態(tài)結(jié)構(gòu),高效防止生物制品的變性和失活。此外,海藻糖還具有良好的水合能力,能夠形成剛性更強(qiáng)的海藻糖/水結(jié)構(gòu),進(jìn)一步增強(qiáng)其抗冷凍脫水能力。
2.蛋白保護(hù)劑
海藻糖在保護(hù)蛋白質(zhì)方面表現(xiàn)良好。在惡劣條件下(如干燥、冷凍或高溫),海藻糖能夠維持蛋白質(zhì)、酶及細(xì)胞的穩(wěn)定性和活性。這是因?yàn)楹T逄悄軌蚋咝У胤€(wěn)定細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),防止其因環(huán)境變化而變性。因此,海藻糖在藥物保存、疫苗運(yùn)輸及細(xì)胞療法等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
3.血液制品保存保護(hù)液
海藻糖還被用于血液制品的保存保護(hù)液中,血液制品在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中容易受到各種環(huán)境因素的影響,導(dǎo)致質(zhì)量和活性下降,海藻糖作為保護(hù)劑,能夠有用延長(zhǎng)血液制品的保質(zhì)期,維持其生物活性和安全性。
海藻糖的檢測(cè)方法
1.高效液相色譜法(HPLC)
高效液相色譜法是目前檢測(cè)海藻糖含量的常用方法。該方法具有靈敏度高、重現(xiàn)性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。在檢測(cè)過程中,通常使用磺化交聯(lián)的苯乙烯-二乙烯基苯共聚物為填充劑的強(qiáng)陽(yáng)離子鈉型(或氫型)色譜柱,以水為流動(dòng)相,并在差折光檢測(cè)器上讀取數(shù)據(jù)。通過標(biāo)準(zhǔn)品和樣品在色譜圖上的峰高和峰面積對(duì)照,可以計(jì)算出樣品中海藻糖的含量。
2.離子色譜法
離子色譜法也是檢測(cè)海藻糖的一種有效方法。該方法利用離子交換原理,將樣品中的海藻糖與其他成分分離,并通過檢測(cè)器測(cè)定其含量。離子色譜法具有分離效果好、檢測(cè)靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),適用于復(fù)雜樣品中海藻糖的檢測(cè)。
3.酶聯(lián)免疫法(ELISA)
酶聯(lián)免疫法是一種基于抗原抗體反應(yīng)的檢測(cè)方法,可用于檢測(cè)樣品中的海藻糖含量。該方法通過特異性抗體與海藻糖結(jié)合,形成抗原抗體復(fù)合物,然后利用酶標(biāo)記的二抗進(jìn)行信號(hào)放大,最終通過測(cè)定吸光度或熒光強(qiáng)度來(lái)定量海藻糖的含量。ELISA法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),適用于大規(guī)模樣品篩查。
海藻糖作為一種優(yōu)異的保護(hù)劑和穩(wěn)定劑,在生物制品領(lǐng)域展現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用前景。其特殊的生物學(xué)特性和良好的穩(wěn)定性,使其在凍干保護(hù)、蛋白保護(hù)及血液制品保存等方面發(fā)揮重要作用。同時(shí),高效液相色譜法、離子色譜法和酶聯(lián)免疫法等檢測(cè)方法的不斷發(fā)展和完善,為海藻糖的研究和應(yīng)用提供了有力支持。隨著研究的深入和技術(shù)的進(jìn)步,相信海藻糖將在更多領(lǐng)域展現(xiàn)出其非凡的魅力,為人類社會(huì)的發(fā)展貢獻(xiàn)更大的力量。
參考文獻(xiàn)
【1】海藻糖的研究與應(yīng)用肖麗蓉張友洪周安蓮肖金樹肖文福(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所,四川南充637000)
【2】海藻糖及其在微生物領(lǐng)域中的應(yīng)用
【3】海藻糖及其在生物制品中的應(yīng)用及檢測(cè)
【4】海藻糖的定量分析是對(duì)其進(jìn)行研究和應(yīng)用的技術(shù)基礎(chǔ)
【5】海藻糖含量測(cè)定方法
【6】ELISA法在海藻糖檢測(cè)中的應(yīng)用
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