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如何選擇免疫組化實(shí)驗(yàn)中所需要的二抗
閱讀：2589 發(fā)布時(shí)間：2015-7-1免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。既然是抗體與抗原的反應(yīng)，抗體就在實(shí)驗(yàn)中顯得特別重要，如何選擇抗體就顯得很重要，今天上海恒遠(yuǎn)與您一起分享一下如何選擇正確的二抗，進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)。
1 種屬來(lái)源要匹配：根據(jù)所用一抗選定二抗。一般來(lái)說(shuō)，如果一抗是小鼠源性，二抗應(yīng)選擇兔/山羊或其它種屬抗小鼠的抗體。目前，美國(guó)Vector公司和 Zymed公司都有開發(fā)的用小鼠抗體檢測(cè)小鼠組織的試劑盒，即一抗來(lái)源于小鼠，該試劑盒采用了通用非特異性封閉液和封閉內(nèi)源性小鼠Ig的封閉液，可以 得到清晰的染色背景。
2.注意抗體同種型和亞型：確定一抗同種型和亞型后，可以選擇抗一抗來(lái)源種屬?gòu)V譜Ig或針對(duì)一抗亞型的二抗。如一抗是小鼠IgG1，可以選用山羊抗小鼠的Ig或IgG1的二抗。
3.正確使用：也需要重新選擇稀釋比例。一般上海恒遠(yuǎn)會(huì)提供稀釋比例從1：10稀釋度始，作5倍比稀釋。
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