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如何避免抗體的冷凍和融化損傷
閱讀:2308 發(fā)布時間:2015-7-16花大價錢買的抗體如果由于由于保存不當導致抗體壞掉,未免有點得不償失,如何防止這樣的事情發(fā)生呢,今天就讓上海恒遠與您一起來分享一下,防止抗體的冷凍和融化損傷的方法。重復冷凍/融化循環(huán)可使抗體變性,導致其形成使抗體結(jié)合能力降低的聚集物。
存于 -20℃ 對于大多數(shù)抗體是適當?shù)?;保存?-80℃無明顯優(yōu)勢。冰箱不能為無霜型。 這些冷凍和融化之間的循環(huán)(以減少結(jié)霜)恰恰是應該避免的。出于相同原因,抗體試劑瓶應置于具有zui小溫度波動的冰箱區(qū)域,例如朝冰箱后部放置而不是置于門架上。
有些研究人員加入冷凍保護劑甘油達到 50% 的終濃度以防止冷凍/融化損傷;甘油可將凝固點降低至低于 -20℃。雖然這對于很多抗體是可接受的,但是只有一小部分我們提供的抗體測試了在該保存條件下的穩(wěn)定性,并且我們的保證僅適用于按數(shù)據(jù)表上推薦的方式保存的抗體。不建議將包含甘油的溶液保存于 -80℃,因為該溫度低于甘油的凝固點。請注意甘油可被細菌污染。如果加入甘油或任何冷凍保護劑,則應當小心操作,以得到無菌制備物。應避免抗體在稀釋至工作濃度后在 4℃ 下保存超過一天。蛋白質(zhì)在高濃度下保存時一般不易降解,理想的濃度為1 mg/ml 或高這是在抗體溶液中加入蛋白質(zhì)例如 BSA 作為穩(wěn)定劑的理論基礎。加入的蛋白質(zhì)也有助于減少抗體因結(jié)合于容器壁上而造成的損失。對于打算進行偶聯(lián)的抗體而言,由于穩(wěn)定蛋白質(zhì)會與抗體競爭,降低了偶聯(lián)的效率,所以不應加入穩(wěn)定蛋白質(zhì)。
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