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T h1 /T h2 細(xì)胞因子對心臟移植大鼠NPC 輸注誘導(dǎo)免疫耐受的作用

李玉僑, 孫立江, 張桂銘, 姚如永

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科, 山東 青島  266003)

[  摘要]      目的  探討大鼠血清中 T h1/ T h2 細(xì)胞因子表達(dá)與供肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞(N PC)輸注誘導(dǎo)心臟移植免疫耐受的關(guān)系。 方法 建立大鼠心臟移植模型, 將 40 只大鼠隨機(jī)分成排斥反應(yīng)組、免疫耐受組, 每組 20 只。 觀察移植心臟存活時(shí)間, 并檢測受者血清中 T h1/ T h2 細(xì)胞因子白細(xì)胞介素 2(IL-2)、干擾素γ(IF N-γ)、白細(xì)胞介素 4(IL-4)、白細(xì)胞介素 6(IL-6)、白細(xì)胞介素 10(IL-10)的表達(dá)水平。 結(jié)果  免疫耐受組供心存活時(shí)間為(30 .83 ±2 .55)d , 排斥反應(yīng)組為(8 .15±2 .08)d, 差異有顯著性(t =24 .46, P <0 .01)。術(shù)后 7 、14 d 排斥反應(yīng)組血清 T h1 細(xì)胞因子 IL-2、 IFN-γ水平均高于免疫耐受組, T h2 細(xì)胞因子 I L-4、IL-10 表達(dá)水平均低于免疫耐受組, 術(shù)后7 d 血清 I L-6 表達(dá)水平顯著高于免疫耐受組(t =4 .50 ～  16 .20, P <0 .01)。 結(jié)論  免疫耐受的形成與 T h1/ T h2 細(xì)胞因子相互作用有關(guān)。

[  關(guān)鍵詞]      T h1 細(xì)胞;T h2 細(xì)胞;心臟移植;肝細(xì)胞;白細(xì)胞介素類;干擾素Ⅱ 型;免疫耐受

[  中圖分類號]      R654.28        [  文獻(xiàn)標(biāo)志碼]      A        [  文章編號]      1672-4488(2011)05-0399-04

THE EFFECTS OF Th1/ Th2 CYTOKINES ON NPC-INFUSION-INDUCED IMMUNE TOLERANCE IN HEART-TRANSPLANTED

RATS    LI YU-QI AO ,  S U N  LI-J I A NG ,  Z H A NG GU I-MI NG ,  Y AO RU-Y O NG    (Department of  Urology ,  T he Affiliated  Hos- pital of Qingdao University  M edical Collage ,  Qingdao  266003 ,   Chin a)

[ ABSTRACT] Ob jective T o s tudy the relation ship betw een T h1/ Th 2 cy tokine expression in serum and im mune tolerance , induced by  non-parenchymal cells (N PC)of donated  liver ,  of cardiac allografts  in  rats.   Methods    A m odel of h eart t ransplant a- t ion  w as  created  in 40  rats ,  and evenly  randomiz ed to rejection  group and immu ne-t olerance group .T he su rvival t ime of th e im plan- ted heart w as ob served ,  the  exp ressions  of serum  Th1/ Th2  cy tokin es :in terferon-γ(IFN-γ),  interleukin-2 (IL-2),   interleu kin-4 (I L-4),  interleukin-6 (IL-6)and  interleu kin-10 (IL-10),  w ere measu red .   Results    T he survival t ime  of  heart allografts  in  tole rance group  was (30 .83 ±2 .55)d ,   and that in  rejection  g rou p w as (8 .15 ±2 .08)d ,   the  di ff erence being  significant  betw een  the tw o  groups (t =24 .46 , P <0 .01).Seven  and  14  days  after  t ran splantation ,   the expression  of  Th 1  cytokines (IL-2 ,   IFN-γ)w ere m uch  high er  in  rejection  group  th an  in  immu ne-t olerance g rou p ,  and  that  of T h2 cytokines (IL-4 ,  IL-10)w ere low er.Seven  day s after  surgery ,   th e exp ression  of  IL-6  in  rejection  group  w as  mu ch  higher  than  imm une-t olerance g rou p (t =4 .50 -16 .20,  P < 0 .01).Conclus ion     Th e formation  of immune  tolerance is associated w ith  interaction  of T h1/ Th 2 cy tokines.

[ KEY WORDS]     Th 1 cells ;T h 2 cells ;heart  t ransplan tation ;hepatocy te ;in terleu kins ;int erferon type  Ⅱ ;immu ne tolerance

隨著醫(yī)學(xué)診療技術(shù)的發(fā)展, qi官移植已成為終末期qi官衰竭病人的*治療方法, 而移植后免疫排斥反應(yīng)阻礙了qi官移植廣泛開展。誘導(dǎo)機(jī)體抗原特異性免疫耐受, 是解決qi官移植排斥的根本方法。已有研究認(rèn)為, Th1 與 Th2 兩類輔助性 T 細(xì)胞的相互作用與免疫耐受形成有關(guān)[ 1]  。本研究通過肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞(N PC)誘導(dǎo)心臟移植免疫耐受的模型, 探討 Th1/ Th2 細(xì)胞因子在誘導(dǎo)免疫耐受中的作用。

1 材料與方法

1 .1 材料

實(shí)驗(yàn)用 8 ～ 12 周齡、體質(zhì)量為 200 ～ 250 g 的健

[ 收稿日期] 2011-01-16 ; [ 修訂日期] 2011-03-21

[ 作者簡介]   李玉僑(1985-), 男, 碩士研究生。

[ 通訊作者]   孫立江(1963-), 男, 博士, 主任醫(yī)師, 碩士生導(dǎo)師。

康封閉群雄性SD 大鼠及 Wistar 大鼠, 由青島派特福德白鼠養(yǎng)殖專業(yè)合作社提供, Lew is 大鼠由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供。Collag enase Ⅱ 、蛋白酶 E 、D nase  Ⅰ 、二甲基亞砜(D MSO)購自 Sigm a 公司, RPM I 1640 及淋巴細(xì)胞分離液購自Solarbio 公司, 無支原體胎牛血清由杭州四季青生物工程材料有限公司提供, si裂霉素 C 由 Ro che 公司提供。大鼠白細(xì)胞介素 2(IL-2)、干擾素 γ(IFN- γ)、白細(xì)胞介素 4(IL-4)、白細(xì)胞介 6(I L-6)、白細(xì)胞介素 10(IL-10)試劑盒由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供。

1 .2    模型的建立及分組

SD 大鼠為供體, Wistar 大鼠為受體。頸部心臟移植模型建立具體方法參照文獻(xiàn)[ 2] 并進(jìn)行改進(jìn)。將供者心臟的主動脈與受者的頸總動脈、供者心臟