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酸水解法測定脂肪操作方法
閱讀：3902 發(fā)布時間：2012-11-7| 提 供 商 | 上海恒遠生物科技有限公司 | 資料大小 | 27KB |
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酸水解法測定脂肪
內(nèi)容摘要：酸水解法適用于各類食品中脂肪的測定，對固體、半固體、黏稠液體或液體食品，特別是加工后的混合食品，容易吸濕、結(jié)塊，不易烘干的食品，不能采用索氏提取法時，用此法效果較好。
1．酸水解法原理
強酸與樣品一同加熱進行水解，結(jié)合或包藏在組織里的脂肪可游離出來，然后用乙迷和石油醚提取脂肪，回收溶劑，除去溶劑后即為脂肪含量。
2．儀器
①100 mL具塞刻度量筒。
②烘箱。
3．試劑
①95％乙醇。
②乙迷（不含過氧化物）。
③石油醚（30~60℃沸程）。
④濃鹽酸。
4．測定步驟
①樣品處理
a．固體樣品：準確稱取約2．0 g，置于50 mL試管中，加8 mL水，混勻后再加10 mL濃鹽酸。
b．液體樣品：準確稱取10.0 g置于50mL試管中，加10 mL，濃鹽酸。
②水解：將試管放入70~80℃水浴中，每隔5～10 min用玻璃棒攪拌一次，至樣品脂肪游離消化*為止，時間約需40~50 rain。水解過程中，如水分蒸發(fā)，應(yīng)適當補加水，保持溶液總體積不變，以避免酸濃度升高。
③提?。喝〕鲈嚬?，加入10 mL乙醇，混合。冷卻后將混合物移人100 mL具塞量筒中，用25 mL乙迷分次洗試管，洗液一并倒人量筒中。加塞振搖1 rain，小心開塞放出氣體，再塞好，靜置12 min，小心開塞，用石油醚一乙迷等量混合液沖洗塞及筒口附著的脂肪。靜置10~20min，待上部液體澄清，吸出上清液于已恒重的燒瓶內(nèi)，再加5 mL石油醚一乙迷等量混合液于具塞量筒內(nèi)，振搖，靜置后，仍將上層乙迷吸出，放人原燒瓶內(nèi)。
④回收溶劑、烘干、稱重：回收燒瓶內(nèi)乙迷后，將燒瓶于水浴上蒸干后，置100~105℃烘箱中干燥2 h，取出放進干燥器內(nèi)，冷卻30 min后稱重，反復干燥冷卻操作至恒重。
5.說明
①測定的樣品需充分磨細，液體樣品需充分混合均勻，以使消化*。
②水解后加的乙醇可使蛋白質(zhì)沉淀，促進脂肪球聚合，同時溶解一些碳水化合物、有機酸等。后面用乙迷提取，因乙醇可溶于乙迷，故需加入石油醚，降低乙醇在醚中的溶解度，使乙醇溶解物殘留在水層，并使分層清晰。
③揮干溶劑后，殘留物中若有黑色焦油狀雜質(zhì)，是分解物與水一同混入所致，會使測定值增大，造成誤差，可用等量的乙迷及石油醚溶解后過濾，再次進行揮干溶劑的操作。
④因磷脂在酸水解條件下分解為脂肪酸和堿，故本法不宜用于測定含有大量磷脂的食品如魚類、貝類和蛋品。此法也不適于含糖高的食品，因糖類遇強酸易碳化而影響測定結(jié)果。