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做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常會(huì)用到血清，血清用不完我們會(huì)凍起來(lái)下次使用。但相信大家也會(huì)發(fā)現(xiàn)在融化血清過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)白色的沉淀物質(zhì)，就會(huì)疑惑這種情況是否是血清出現(xiàn)問(wèn)題。

??首先呢我們要搞清楚血清中絮狀沉淀物是什么，沉淀物包含纖維蛋白和脂蛋白，這是正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀，離心血清（400g，1~2分鐘）或簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無(wú)菌瓶里（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解。所以，使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃，沉淀會(huì)自然消失。

 

（1）怎樣才能降低沉淀物的發(fā)生呢？

 

1. 解凍血清/分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

 

2. 勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。

 

3. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要無(wú)須做此步驟。

 

（2）使用時(shí)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法：

 

一、保存血清最-好的方法

 

??血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃，若存放于4℃請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若無(wú)法一次用完一瓶，建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

 

二、如何解凍血清不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損

 

??將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

 

三、避免沉淀物的產(chǎn)生

 

1. 解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

 

2. 解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

 

3. 請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

 

4. 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要無(wú)須做此步驟。

 

5. 若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30分鐘的原則，并隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

 

四、如何處理血清解凍后有絮狀沉淀物出現(xiàn)

 

??想要去除這些絮狀沉淀物，可將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。但不建議以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。

 

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