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青藤堿對(duì)肝細(xì)胞癌模型大鼠肝移植術(shù)后免疫應(yīng)答的影響*

王欣玲 1 羅 霞 1 孫建琴 1 鄒 艷 1 陳德森 2△

（1.湖北省十堰市太和醫(yī)院，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院，湖北 十堰 442000；

2.湖北醫(yī)藥學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)室，湖北 十堰 442000）

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1004-745X（2017）02-0222-04doi：10.3969/j.issn.1004-745X.2017.02.011

【摘要】 目的 建立大鼠肝細(xì)胞癌（HCC）模型，觀察青藤堿對(duì)肝細(xì)胞癌大鼠肝移植術(shù)后免疫應(yīng)答的影響。方法將 60 只雄性 Lewis 大鼠用二乙基亞硝胺灌胃 14 周的方法建立大鼠肝細(xì)胞癌模型，成模后將用 DA 大鼠作為供體進(jìn)行肝臟移植，術(shù)后隨機(jī)分為模型組、青藤堿組。 青藤堿組用青藤堿［2.0 mg/（kg·d）］灌胃，模型組灌等體積 0.9%氯化鈉注射液。 采用 ELISA 法檢測(cè)第 1、2、3、4 周肝臟組織中白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）及趨化因子-10（IP-10）；采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)靜脈血 T 細(xì)胞（Treg）、CD4+ T、CD8+ T 等占 T 淋巴細(xì)胞的百分比。 結(jié)果 青藤堿組在第 3 周和第4 周時(shí)，肝臟組織中 IL-2、IL-6，靜脈血 Treg%、CD4+T %明顯降低，第 4 周時(shí) TNF-α、TGF-β1 和 IP-10 明顯降低，與模型組比較（P < 0.05），且以上各指標(biāo)在 4 周時(shí)的檢測(cè)值與同組 1、2、3 周時(shí)比較，差異有統(tǒng)計(jì)意義（P <0.05）。 結(jié)論 青藤堿可抑制肝細(xì)胞癌大鼠肝移植術(shù)后細(xì)胞免疫。

【關(guān)鍵詞】 大鼠 青藤堿 肝細(xì)胞癌 肝臟移植 細(xì)胞免疫 免疫應(yīng)答肝細(xì)胞癌占原發(fā)性肝癌的 75％～80％［1］。 WHO 統(tǒng)計(jì)顯示，這各病理類(lèi)型的肝癌患者死亡率高、預(yù)后差，占所有惡性腫瘤死亡率的第 2 位， 且一半以上的肝癌發(fā)生在我國(guó)［2］。 由于肝細(xì)胞癌發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，且傳統(tǒng)抗癌藥治療療效不佳， 而肝臟移植是中晚期肝細(xì)胞癌 5 年生存率很高的治療方法，但qi官移植后免疫反應(yīng)常造成器官排斥，如何降低排斥反應(yīng)、提高移植成功率、 提高 5 年生存率成為當(dāng)前治療至關(guān)重要的研究?jī)?nèi)容。中醫(yī)中藥在抗癌方面往往發(fā)揮著重要作用，如青藤堿， 目前體外實(shí)驗(yàn)均顯示其具有抗腫瘤的藥理活性［3］。 青藤堿是中草藥防己科植物青風(fēng)藤的根莖提取而成的生物堿單體，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用，國(guó)內(nèi)已有鹽酸青藤堿注射液、鹽酸青藤堿片等制劑，用于治療急性關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、白血病、前列腺癌、肺癌、肝細(xì)胞癌及宮頸癌等，均有一定的抗腫瘤作用［4］。 筆者在本移植實(shí)驗(yàn)中，系統(tǒng)觀察了青藤堿對(duì)肝細(xì)胞癌肝移植術(shù)后大鼠細(xì)胞免疫功能的影響， 為臨床肝臟移植提供可靠的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 雄性 Lewis 大鼠 （受體） 和雄性 DA 大鼠（供體）各 60 只，9～10 周齡，體質(zhì)量 180～200 g，十堰市太和醫(yī)院科研中心從上海購(gòu)進(jìn) ［許可證 SYXK （鄂）2014-0031］。

1.2 藥物與試劑 鹽酸青藤堿腸溶片（煙臺(tái)魯銀藥業(yè)有限公司，批號(hào) H37023717，規(guī)格 20 mg）；二乙基亞硝胺（上 海恒遠(yuǎn)生物 科技 有 限 公 司，批 號(hào) H20160211）；戊 ba比 妥 鈉 （上 海 哈 靈 生 物 科 技 有 限 公 司 ， 批 號(hào)H0160527）；大鼠 白介 素-2（IL-2）、白 介 素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）ELISA 試劑盒（上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，批號(hào) 0160524、0160528、0160526）。 大鼠轉(zhuǎn)化 生 長(zhǎng) 因 子-β1（TGF-β1）、腫 瘤 壞 死 因 子-α（TNF-α）、趨化因子-10（IP-10）ELISA 試劑盒（上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，批號(hào) XF160420、XF160422、 XF160426）。

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