詳細介紹
CBC,CBG,豬皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白ELISA試劑盒技術(shù)指導(dǎo)
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中豬皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBC,CBG)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被豬皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBC,CBG)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豬皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBC,CBG)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
標本要求
1. 血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
問題解答
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照解析
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照:陰、陽性對照若有正確的結(jié)果,對試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。
空白對照:對ELISA試劑來說,空白對照實際上是不加標本不加酶做對照。空白對照主要測系統(tǒng)的吸光率。空白對照在單波長測量時顯得尤其重要
我司代理幾千種ELISA試劑盒,數(shù)萬種抗體,并代理產(chǎn)品近萬種,涉及分子生物學(xué)、分子免疫學(xué)、細胞生物學(xué)等生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域。為了節(jié)省您的時間,我們還可以提供代檢測服務(wù)。
注意事項
1. 由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
2. 檢測吸光度前應(yīng)將酶標儀打開,將其預(yù)熱30min以上。
3. 孵育的時間應(yīng)該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。
4. 要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
5. 對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
代測服務(wù)
客戶以快遞形式送標本,上海市內(nèi)客戶代測樣本可享我司上門取樣服務(wù)。
本公司公布的試劑盒,可以提供代測服務(wù)。
本公司上尚未列出的試劑盒,可以代為研發(fā)和測定,費用等相關(guān)信息咨詢。