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既簡(jiǎn)單又粗暴的組織樣本總蛋白提取方法
閱讀:5259 發(fā)布時(shí)間:2017-9-14九月的手掌拂去小溪夏日的狂躁,用心聆聽著秋日的私語,溫順地彈唱著九月醉人的秋歌,惹得天空湛藍(lán)高遠(yuǎn),碧空如洗。今天上海恒遠(yuǎn)小編分享一篇既簡(jiǎn)單又粗暴的組織樣本總蛋白提取方法,希望能幫助到您!
組織樣本總蛋白提取(小鼠肝組織):
1、頸椎脫臼處死小鼠,75%乙醇擦拭皮膚,剪開腹腔,剪切肝臟組織。
2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。
3、稱取0.6g左右肝組織,在平皿中剪碎組織,并轉(zhuǎn)移到勻漿器。
4、預(yù)冷裂解液中添加PMSF(20ug/2ml)。
5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,迅速加入勻漿器,冰浴條件下充分研磨。
6、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。
7、4℃,15000rpm,離心10min。
8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。
9、進(jìn)行蛋白定量,-80℃保存。
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