技術(shù)文章
ELISA實驗做復(fù)孔有必要嗎
閱讀:12807 發(fā)布時間:2016-3-14本周一上午,中南大學(xué)劉老師送樣我司代測人IL-24的ELISA實驗。劉老師所送樣本量較少(18個樣本),訂購了我司試劑盒的zui小規(guī)格就是48T(48T可以檢測37個樣本,11孔做標(biāo)準(zhǔn)空白對照孔),收到劉老師樣本后我司銷售專員建議老師實驗可以做個復(fù)孔,這樣的實驗報告結(jié)果會更加。
劉老師聽取了我司銷售專員的建議,在設(shè)計ELISA復(fù)孔檢查時,提出問題:是對同一個樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個孔?
我司技術(shù)答復(fù):
在實驗室階段,可能需要多次稀釋,然后將不同稀釋次數(shù)的分別做復(fù)孔,以便檢查稀釋過程中帶來的誤差;如果同一次稀釋的復(fù)孔一致的存在檢測差異大,可能ELISA板的均一性存在一定問題(排除操作因素)。如果不同稀釋次數(shù)差異大,說明稀釋方法有問題。在ELISA實驗中設(shè)復(fù)孔,目的是為了減少本次實驗的系統(tǒng)誤差對實驗數(shù)據(jù)帶來的影響,有條件的話復(fù)孔的數(shù)量可以增加,系統(tǒng)誤差更小。