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技術(shù)文章

三種方法助您評判免疫組化結(jié)果分析

閱讀:1741          發(fā)布時間:2016-5-10

                 三種方法助您評判免疫組化結(jié)果分析

免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。想要在做完實驗評判結(jié)果,上海恒遠(yuǎn)生物教您三種方法,簡單易學(xué),方便快捷,一起跟隨小編去看看吧!
(1)陽性著色細(xì)胞計數(shù)法。在40*光鏡下,隨機選擇不重疊的10個視野,人工或機器計數(shù)陽性著色細(xì)胞,每組3~6張不同動物組織切片,然后進行組間比較即可。  
(2)灰密度分析法。通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進行灰密度分析,然后進行統(tǒng)計分析即可。  
(3)評分法。通過在光學(xué)顯微鏡下對組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進行評分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),zui終可以分?jǐn)?shù)相加,再進行比較。  
對于以上這幾種方法,各有利弊,請細(xì)心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片。

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