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伏馬毒素ELISA試劑盒說明書
閱讀:960 發(fā)布時間:2013-7-12本試劑盒僅供研究使用。
伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的:
本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),雞蛋、蜂蜜、牛奶、血
清和尿樣中伏馬毒素(FB1)殘留的定量檢測。
伏馬毒素ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒采用競爭ELISA 方法,在微孔板包被有伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原,加入伏
馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離伏馬毒素(FB1)與微孔條上預(yù)包被的伏馬毒素(FB1)
偶聯(lián)抗原互相競爭抗伏馬毒素(FB1)抗體酶標(biāo)記物,用TMB 底物顯色,加入終止液后顏
色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中伏馬毒素(FB1)
含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中伏馬毒素(FB1)的含量。
伏馬毒素ELISA試劑盒組成
預(yù)包被的伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1 塊(12 孔×8 條)。
伏馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品:6 瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7
ppb,8.1 ppb。
抗伏馬毒素(FB1)抗體酶結(jié)合物:1 瓶(6ml)。
顯色液A:1 瓶(6ml)。
顯色液B:1 瓶(6ml)。
終止液:1 瓶(6ml),2M 硫酸。
樣本稀釋液:1 瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用。
濃縮洗滌液:1 瓶(20×,20ml),用于洗板。
說明書一份。
伏馬毒素ELISA試劑盒貯存:
1.試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍
2.未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項
1.使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。
2.不要使用過期試劑盒。
3.試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有伏馬毒素(FB1),使用時應(yīng)特別注意,操作時應(yīng)帶手套。
5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結(jié)果。
7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響
實驗結(jié)果。
8.稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會影響實驗結(jié)果
9.混合試劑時應(yīng)避免起泡。
伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準(zhǔn)備
伏馬毒素(FB1)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用
樣本稀釋液:備用
顯色劑:已備用,避免光線直照
反應(yīng)終止液:已備用
伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理:
取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
強力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過濾
取25μl處理后的樣品,加入25μl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
伏馬毒素ELISA試劑盒結(jié)果計算
定量分析:
所獲得的每個濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))
的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。
B— 標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0— 0μg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
以伏馬毒素(FB1)濃度的對數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根
據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對應(yīng)點的橫坐標(biāo),即為伏馬毒素(FB1)濃度的對數(shù)
值,求得反對數(shù)即為測定液中伏馬毒素(FB1)濃度C(ppb)
由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋
倍數(shù)。
半定量測定:
目測半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光
度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。
儀器半定量測定:首先選擇一個適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色
深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。