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恒遠分析血液DNA提取試劑盒說明書
閱讀:763 發(fā)布時間:2014-10-13血液DNA提取試劑盒特點
本產(chǎn)品是基于離心柱/硅膠膜原理的、專門用于從新鮮或冷凍的動物(包括人和禽類)抗凝全血中提取基因組DNA的試劑。它具有下列特點:
1.DNA純凈,OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質(zhì)和RNA污染,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
2.產(chǎn)量高,一般為1-10 ug/mL全血(對哺乳動物血液)。
3.操作簡單,整個過程約20分鐘,全室溫操作,適合大規(guī)模樣品處理。
4.用量廣泛, 每次可以處理少達20 uL(對禽類動物血液), 多達1 mL的血液(對哺乳動物血液)。
5.安全無毒,本試劑盒對人體無毒,無腐蝕性和刺激性氣味。
規(guī)格及成分
成 份 50次包裝
溶液A 25mL
溶液B 25 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50mL
通用洗脫液 5 mL
使用手冊 1份
運輸及保存
常溫運輸、4℃保存,有效期一年
血液DNA提取試劑盒使用方法
1.在0.02-1 mL新鮮或抗凝血液(冷凍血需先37℃水浴融化)中加入0.5 mL溶液A,吹打混勻。
a)哺乳動物,血液使用量以300 uL以下為宜,使用量越大產(chǎn)量越高,但產(chǎn)率會降低。如果血液多于300 uL,重復1-2步兩次可以提高產(chǎn)率。
b)禽類動物,血液使用量以20 uL以下為宜,可以從第3步做起。
2.室溫12,000-15,000 rpm離心2分鐘,沉淀呈粉紅色,小心傾去上清。
3.再短暫離心半分鐘,吸棄殘留的液體。此步有利于后面的細胞裂解,但一般可以省略。
4.向有沉淀的離心管內(nèi)加入0.5 mL溶液B(溶液B有少量晶體沉淀,用前需要搖晃均勻),用移液槍吹打使沉淀充分懸浮起來。此步目的是裂解細胞,釋放DNA,所以吹打越充分越好。
5.靜置2分鐘待溶液變清亮后,將液體轉移到離心吸附柱中并靜置2-5分鐘,以使DNA與膜充分結合。
6.12,000 rpm離心半分鐘,DNA將吸附到膜上,棄收集管中的廢液。
7.加入0.7 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,棄收集管中的廢液。
8.加入0.3 mL的通用洗柱液,12,000 rpm離心半分鐘,棄收集管中的廢液。
9.12,000 rpm離心半分鐘,甩干殘留液體。此步很重要,以去除膜上殘留通用洗柱液,否則會影響后續(xù)反應。
10.將離心吸附柱置于一新的1.5 mL塑料離心管(自備)中,加入適量50 uL通用洗脫液,室溫放置2分鐘。如果將通用洗脫液在65℃預熱后再使用,洗脫DNA的效果會更好。
11.12,000 rpm離心半分鐘,離心管底溶液即DNA溶液??梢粤⒓词褂没蚍疟溟L期保存。
上海恒遠生物提供血液DNA提取試劑盒-柱式 Column Blood DNAout