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                                李工年末分享細(xì)胞因子溶解方法
     我們知道，PeproTech的所有細(xì)胞因子和蛋白均為凍干粉，這使得運(yùn)輸非常便捷，只要常溫即可。而且，細(xì)胞因子和蛋白凍干粉非常穩(wěn)定，在-20oC或-80oC條件下可保存數(shù)年。凍干粉在使用前需進(jìn)行溶解，然后以液體形式加到培養(yǎng)體系或注射入動(dòng)物體內(nèi)。溶解步驟非常關(guān)鍵，因溶解不好會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞因子或蛋白的失活，這也是很多用戶在實(shí)際使用中經(jīng)常遇到的問(wèn)題。

技術(shù)部李工分享： PeproTech細(xì)胞因子中不含載體蛋白（Carrier Protein）或其他添加劑（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以zui少量的鹽來(lái)進(jìn)行凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過(guò)程中會(huì)沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見(jiàn)的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開(kāi)蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底（此時(shí)能否見(jiàn)到白色沉淀均屬正?，F(xiàn)象）。 

1．離心：高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。 

2．溶解（Reconstitution）：PeproTech細(xì)胞因子用去離子水或其它緩沖液（根據(jù)說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行選擇）溶解至說(shuō)明書(shū)要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的產(chǎn)品，需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。溶解時(shí)不可振蕩，避免因化學(xué)鍵的斷裂造成蛋白失活，可加入適當(dāng)?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時(shí)間，待細(xì)胞因子*溶解后使用。溶劑的選擇： 
      1）要求用去離子水溶解的產(chǎn)品，務(wù)必不可用鹽溶液，避免過(guò)高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出； 
      2) 要求用鹽溶液溶解的產(chǎn)品，請(qǐng)依照PeproTech細(xì)胞因子說(shuō)明書(shū)上的濃度，同樣也是為了避免過(guò)高的鹽濃度。 

 經(jīng)常有用戶會(huì)問(wèn)，為什么會(huì)有這么多種溶解方法？
            答：我們知道，蛋白的溶解性與很多因素有關(guān)，其中比較重要的是pH值和離子強(qiáng)度。PeproTech的細(xì)胞因子或重組蛋白在出廠前均經(jīng)嚴(yán)格測(cè)試，說(shuō)明上所標(biāo)明的溶解液是能夠?qū)⒃摷?xì)胞因子或重組蛋白*溶解的液體。如果您所用的溶解液的pH值和離子強(qiáng)度與說(shuō)明書(shū)中所標(biāo)明的不符，很多時(shí)候會(huì)造成細(xì)胞因子或重組蛋白不能*溶解或者根本無(wú)法溶解，這樣所配得的細(xì)胞因子或重組蛋白必然活性不夠或喪失。