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蘇木素HE 染色月底*
閱讀:891 發(fā)布時間:2015-9-22上海恒遠生物生產(chǎn)的蘇木素染色液(Hematoxylin Staining Solution)綜合了多種經(jīng)典的蘇木素染色方法,例如Harris法、Mayer法等,簡化了操作步驟,縮短了操作時間,并且染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑??梢杂糜诮M織切片或培養(yǎng)細胞的染色。桂花飄香之日開啟月底*活動,詳情請。
本蘇木素染色液染色后細胞核呈藍色。
本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進行免疫熒光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫組化染色后再進行蘇木素復染。
本染色液可以重復使用,直至認為效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可以染色
200個樣品。蘇木素(Hematoxylin)和伊紅( Eosin)染色,簡稱HE 染色,是病理學常規(guī)制片中zui基本的染色方法,應用機器廣泛。蘇木精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中,常用HE 染色對正常組織和病變組織進行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察。對于確定或鑒別病變組織、細胞中出現(xiàn)的某些異常物質(zhì)與特殊成分,而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學方法、免疫組織化學方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎上進行的。在HE 染色的組織切片中,細胞核呈藍色,細胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。蘇木素伊紅染色試劑盒中,蘇木素染色液采用進口的高純度蘇木精、硫酸鋁鉀、甘油等組成,甲醇等有害物質(zhì),對細胞核染色效果好。其特點:長期保存,不易產(chǎn)生沉淀和金屬; 應用范圍廣,可以用于人、動物、畜牧、水產(chǎn)等領域,可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等;蘇木素染色液可以重復使用。
染色原理:
1、細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
2、細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細胞漿的染色與染液的pH 值密切相關(guān)。當染液的pH 值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在HE 染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色,才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
4、返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍,但所需時間較長。
注意事項:
1、切片脫蠟應盡量干凈。
2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇應經(jīng)常更換新液。
3、1%的鹽酸乙醇分化液的分化時間應該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和1%的鹽酸乙醇分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠,以便*清洗酸。
4、乙-乙醇混合固定液是由醚和95%乙醇等量混合而得,再加入適量乙酸,密閉保存。
5、冷凍切片染色時間盡量要短。
6、促藍液常使用0.2~1%氨水水溶液或Scoot 促藍液或0.1~1%碳酸鋰水溶液。
7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8、使用場所應通風,并遠離火源。
有效期: 12 個月有效。
中文名稱: 蘇木色精
其他中文名稱: 蘇木素;蘇木色素;蘇木精
蘇木素英文名稱: Hematoxylin
其他英文名稱: 7,11b-Dihydrobenz[b]inde,2-d]pyran-3,4,6a,9,10(6H)-pentol;C.I.75290;Natural Black 1