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恒遠(yuǎn)技術(shù)提醒科研新手“ELISA實(shí)驗(yàn)操作千萬(wàn)別走的誤區(qū)”
閱讀:624 發(fā)布時(shí)間:2016-3-24近期開(kāi)始,眾多從事醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)等碩士研究生即將迎來(lái)他們的畢業(yè)課題。其中不乏有真正沒(méi)有自己獨(dú)立操作過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)的新手。而即將迎來(lái)的畢業(yè)課題將又不得不靠自己獨(dú)立完成。在此。我司技術(shù)部歐陽(yáng)技術(shù)總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作易走的誤區(qū)。希望能夠幫助到廣大科研新手順利完成實(shí)驗(yàn)、順利畢業(yè)。
①:液體全部加入酶標(biāo)孔后,將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應(yīng)。
②:盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
③:手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
④:將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。吸入液體時(shí)的的方法是吸兩檔打一檔,防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
⑤:由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,因此要避光保存。
⑥:底物為T(mén)MB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
⑦:要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),溫度環(huán)境為20%左右時(shí),lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其zui高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
⑧:實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標(biāo)板只要取出所需量。
⑨:孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
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