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雙抗體夾心法檢測HBsAg試劑盒

閱讀:1683          發(fā)布時間:2016-7-12
關鍵詞:HBsAg試劑盒ELISA 簡介:ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關液體中ACA IgA含量。 產(chǎn)品報價說明: 產(chǎn)品名稱:HBsAg試劑盒ELISA 規(guī)格:96T/48T 運輸:2~8°保存運輸 服務:提供免費代測服務,提供。

以已知抗體(抗HBs)包被載體,然后將含有抗原的待檢標本加入,共同孵育后,抗原結合于包被抗體上,再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs),酶標抗體連接到抗原上,zui后加入底物溶液,根據(jù)顏色反應來判定抗原含量。

使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中乙肝表面抗原ELISA試劑盒(HBsAg)含量。
實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中人乙肝表面抗原(HBsAg)水平。用純化的人乙肝表面抗原(HBsAg)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乙肝表面抗原(HBsAg)標準品和未知濃度的HBsAg待檢樣品,溫育后,加入生物素標記的抗IgG抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙肝表面抗原(HBsAg)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人乙肝表面抗原(HBsAg)濃度。

一、材料

HBsAg試劑盒,本試劑盒含: 

1、包被抗-HBs反應條 1瓶

2、酶結合物 1瓶

3、HBsAg陽性對照 1瓶

4、HBsAg陰性對照 1瓶

5、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶

6、顯色劑(TMB)A 1瓶

7、顯色劑(TMB)B 1瓶

8、終止液 1瓶

二、方法

1、加入待測標本每孔0.05ml,并設HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。

2、洗板:棄去反應條孔內(nèi)液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復五次后拍干。

3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。

4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。

三、結果

比色法:波長450nm,先用空白孔校零點,然后讀取各孔光密度值。

樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。

備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8,實驗結果有效。 

四、注意事項

1、試劑盒置2℃~8℃保存。

2、使用前試劑應搖勻,并棄去1~2滴后垂直滴加。

3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內(nèi)全部瓶裝試劑及待測標本所需微孔條,置室溫平衡30分鐘后再行測試,余者應及時封存于冰箱中以備后用。

4、待測標本不可用NaN3防腐。

5、不同批號試劑請勿通用。

6、結果判斷須在10分鐘內(nèi)完成。

7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶時,請置37℃至溶解。

 

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