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BIM課堂分析：ELISA試劑盒操作秘訣
閱讀：682 發(fā)布時(shí)間：2016-11-3
BIM Biological technology co., LTD于1996年成立于美國(guó)，致力于各種細(xì)胞因子及其相關(guān)分子的生產(chǎn)研發(fā)，其生產(chǎn)的各種ELISA試劑盒、重組因子及抗體以其的品質(zhì)贏得了各國(guó)科研及臨床診斷機(jī)構(gòu)的青睞。 該公司產(chǎn)品豐富涵蓋了百余種細(xì)胞因子類ELISA試劑盒, 重組細(xì)胞因子類蛋白（209種之多）及相關(guān)的多達(dá)250余種單克隆、多克隆抗體；白介素系列、腫瘤壞死因子系列以及細(xì)胞因子類等熱點(diǎn)領(lǐng)域。本章就由BIM課堂為您具體分析ELISA試劑盒操作秘訣。
有2種方法來(lái)檢驗(yàn)試驗(yàn)的度：通常用變異系數(shù)來(lái)表示，①幾個(gè)樣品用ELISA法同時(shí)進(jìn)行多次測(cè)定求出CV%；②不同時(shí)間對(duì)不同操作者對(duì)某幾個(gè)樣進(jìn)行多次測(cè)定求出變異系數(shù)。CV是個(gè)體參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差與平均數(shù)的比率。
ELISA試劑盒記錄結(jié)果有下列幾種方法：
1.“+"或“-"：所有超過(guò)規(guī)定的OD值(如OD，0.4)的標(biāo)本均屬陽(yáng)性，此規(guī)定OD值是根據(jù)事先測(cè)定大量陰性標(biāo)本所取得的，此規(guī)定值是陰性標(biāo)本的上限。ELISA試劑盒或者以一組陰性標(biāo)本OD平均值加2～3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差作為陽(yáng)性閾值。
2.直接以O(shè)D值來(lái)表示，如0.4、0.7、1.2，OD值越大，陽(yáng)性反應(yīng)越強(qiáng)，但此數(shù)值是在固定實(shí)驗(yàn)條件下得到的結(jié)果，而且每次實(shí)驗(yàn)都要有參考標(biāo)本作對(duì)照。
3.以終點(diǎn)滴度表示：將標(biāo)本作連續(xù)稀釋，zui高稀釋度能出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)者(即OD值仍大于陽(yáng)性閾值)，即為該標(biāo)本的滴度。
4.以“比值"表示：求出被檢標(biāo)本的OD值與一組陰性標(biāo)本OD值的比值，例如為陰性標(biāo)本的2倍或3倍，即為陽(yáng)性，比值小于2.1而大于1.5為可疑，<1.5為陰性。
5.以“單位"來(lái)表示：在測(cè)定被檢標(biāo)本的同時(shí)，再測(cè)定一個(gè)含已知單位數(shù)的陽(yáng)性參考血清，用不同稀釋度作ELISA檢測(cè)試劑盒后，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，單位數(shù)為橫坐標(biāo)，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。以后可根據(jù)被檢標(biāo)本的OD值，從曲線上找出相應(yīng)的單位數(shù)，再乘于血清的稀釋倍數(shù)，即可得出被檢標(biāo)本的單位數(shù)。