詳細介紹
elisa檢測 elisa kit 人5羥基吲哚乙酸試劑盒
人5羥基吲哚乙酸試劑盒
Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA KIT
可測種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬…
可測標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液
規(guī)格:96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測 科研試劑
經(jīng)營品牌:RD RB IBL
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml??衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過一夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
Elisa試劑盒實驗規(guī)則:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
操作程序總結(jié):
1.準備試劑,樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘
3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
上海恒遠生物有限公司大量供應ELISA試劑盒(RD ELISA Kit Omega ELISA Kit),抗體(兔單抗、鼠單抗、分裝抗體、免疫組化抗體、二抗、標簽抗體),細胞(ATCC原代細胞、培養(yǎng)基、正常細胞、腫瘤細胞),生化試劑(氨基酸、緩沖劑、分離試劑、培養(yǎng)基、蛋白質(zhì)、酶、生化酶及輔酶、核酸及其衍生物、碳水化和物、抗生素、染色劑、維生素試劑)。歡迎您。
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