您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
18017111930
當(dāng)前位置：迪圖（上海）生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>免疫酶標(biāo)技術(shù)
1） 直接法
1．標(biāo)本固定。
2．PBS洗滌2×3分鐘。
3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制內(nèi)源性過氧化物，室溫10～20分鐘。
4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。
5．滴加酶標(biāo)記的抗體37℃1小時(shí)或4℃過夜。
6．PBS洗滌3×3分鐘。
7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色結(jié)果。DAB＋H2O2應(yīng)用前15分鐘配制。
8．充分水洗后，復(fù)染、脫水、透明、封片、鏡檢。
2） 間接法
1．標(biāo)本固定。
2．PBS洗滌2×3分鐘。
3．1％H2O2（或1％H2O2 甲醇）抑制內(nèi)源性過氧化物，室溫10～20分鐘。
4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。
5．滴加第一抗體，37℃1小時(shí)或4℃過夜。
6．PBS洗滌3×3分鐘。
7．滴加酶標(biāo)二抗，室溫1小時(shí)。
8．PBS洗滌3×3分鐘。
9．0.04％DAB＋0.03 ％H2O2顯色5～10分鐘。
10． 充分水洗后，復(fù)染、脫水、透明、封片、鏡檢。
3） PAP法（過氧化物酶抗過氧化物酶抗體復(fù)合物法）
1．標(biāo)定固定后，PBS洗滌。
2．1％H2O2（或1％H2O2 甲醇）阻斷內(nèi)源性過氧化物，室溫10～20分鐘。
3．PBS洗滌2×3分鐘。
4．正常血清（二抗的正常血清）孵育，室溫20分鐘。
5．滴加一抗，室溫1小時(shí)或4℃過夜。
6．PBS洗滌3×3分鐘。
7．滴加二抗，室溫30分鐘。
8．PBS洗滌3×3分鐘。
9．加PAP復(fù)合物，室溫60分鐘。
10． PBS洗滌3×3分鐘。
11． 0.04％DAB＋0.03％ H2O2顯色5～10分鐘。
12． 充分水洗。
13． 蘇木精復(fù)染，封片觀察。
4） 雙PAP法
1～10同單PAP法。
11． 二次加酶標(biāo)二抗。
12． PBS洗。
13． 二次加PAP。
14． PBS洗。
15． 0.04％DAB＋0.03 ％H2O2顯色5～10分鐘。
16． 蘇木精復(fù)染核，封片，鏡檢。
5） ABC法（卵白素－生物素－過氧化物酶復(fù)合物法）
1～8同PAP法
9）加ABC液，室溫60分鐘。
10） PBS洗。
11） 0.04％DAB＋0.03％ H2O2顯色5～10分鐘。
12） 充分水洗。
13） 蘇木精復(fù)染核，封片，鏡檢。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
