分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)
產(chǎn)品品牌:
分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)|實驗技術(shù)服務(wù)
測序?qū)嶒灹鞒?
分子克隆的相關(guān)載體: DNA的片段的克隆需要合適的載體,載體或是質(zhì)粒,或是噬菌體,或是病毒,通常大多經(jīng)過人工改造。作為載體必須具備兩條件:-是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制, 即必須具備復(fù)制原點;二是該載體必須具備適合的酶切位點,且這些酶切位點不在復(fù)制原點區(qū)域內(nèi)。以上兩條,保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆,載體上常有篩選標(biāo)記,如對抗菌素的抗性,某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。
服務(wù)要求:
1、請以郵件、文字等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括: PCR擴(kuò)增產(chǎn)物; RT - PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA的片段等。
3、提供DNA的片段的電泳照片,并請標(biāo)明Marker有濃度。
4、提供載體來源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。
相關(guān)材料說明:
1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。
2、實驗中涉及的堿基序列請以郵件的形式發(fā)到我中心。
3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料: (質(zhì)粒大小, 抗性,拷貝數(shù),多克隆位點等)如果是商品化載體,請您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱;如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請注明大體結(jié)構(gòu)情況。
4、我中心可以提供常用的如(氨芐青霉素,氯霉素,卡那霉素)以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品,請您標(biāo)注具體的OD數(shù),如果是液體態(tài),請您標(biāo)明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。
(建議同時提供相應(yīng)的質(zhì)粒) ;如果提供質(zhì)粒,則質(zhì)粒的量建議在4ug以上;如果提供的是PCR產(chǎn)物,則PCR產(chǎn)物量建議在5u以上(附上電泳圖)
- 用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應(yīng)首先在液氮中速凍,保存在- 80度的冰箱中,使用干冰運輸。
結(jié)果提供:
1、相關(guān)的實驗說明和相關(guān)的酶切圖片。
2、測序的結(jié)果。
3、構(gòu)建好的載體和菌液各-份。
4、如有鑒定的客戶提供PCR鑒定圖片。
實驗代做服務(wù):
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