產(chǎn)品名稱:豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒
英文名稱:guinea pig matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISAKit
標(biāo)本的收集與保存:標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。
一、血液標(biāo)本
有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件*為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。
1.外周血
一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(cè)(如白細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類等)受生理因素影響波動(dòng)過(guò)大,比較時(shí)宜使條件盡量*。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測(cè)項(xiàng)目(如血小板計(jì)數(shù),出血時(shí)間或凝血時(shí)間等)的檢測(cè),一定要注意了解患者是否用過(guò)抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。
2.靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測(cè)等項(xiàng)目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測(cè)項(xiàng)目的分析檢測(cè)可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測(cè)項(xiàng)目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標(biāo)本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測(cè)定如ACP活性等),0-4℃貯存活性減弱也不一,這些項(xiàng)目的檢測(cè)必須及時(shí)而快速;有些(如肌酸激酶等)受運(yùn)動(dòng)等因素影響較大。抽血時(shí)避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測(cè)定。
二、尿液標(biāo)本
同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏感性,檢出較輕微的病變。12小時(shí)尿細(xì)胞計(jì)數(shù)即Addis計(jì)數(shù)(前晚8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液),因時(shí)間較長(zhǎng),細(xì)菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時(shí)尿(*天晨8時(shí)排空膀胱后留取至次日晨8時(shí)的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測(cè)不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細(xì)菌培養(yǎng),要求無(wú)菌,沖洗外陰后留取標(biāo)本。所有尿標(biāo)本的收集都應(yīng)足量,zui少12 ml,50 ml,定時(shí)尿須全部收集,對(duì)女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標(biāo)本。
三、糞便標(biāo)本
糞便標(biāo)本的檢測(cè)對(duì)判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價(jià)值。采集時(shí)要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對(duì)外觀無(wú)異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計(jì)數(shù)應(yīng)收集24小時(shí)糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時(shí)應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(yàn)(化學(xué)法),試驗(yàn)前3日禁食肉類及含動(dòng)物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標(biāo)本采集后1小時(shí)內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞。
四、腦脊液標(biāo)本
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過(guò)久將影響檢驗(yàn)結(jié)果:如細(xì)胞變性,破壞,導(dǎo)致計(jì)數(shù)和分類不準(zhǔn);有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個(gè)無(wú)菌管,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)本采集較難,全部送檢和檢測(cè)過(guò)程應(yīng)注意安全。
五、胸腹水標(biāo)本
與腦脊液標(biāo)本一樣,采集后的標(biāo)本注意安全,及時(shí)送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。
六、前列腺液標(biāo)本
前列腺液標(biāo)本由前列腺按摩后采集,液量少時(shí)直接滴在載玻片上及時(shí)送檢,須注意防止標(biāo)本蒸干,量多時(shí)收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。
七、精液標(biāo)本
精液標(biāo)本采集前應(yīng)禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時(shí)送檢。由于精子生成日間變動(dòng)較大,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
八、陰道分泌物標(biāo)本
陰道標(biāo)本采集前24小時(shí)應(yīng)禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標(biāo)本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標(biāo)本。
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ACA-IgA ELISAKit
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樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。ELISA原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn)
在應(yīng)用ELISA時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測(cè)抗體還是抗原?2,檢測(cè)的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測(cè)特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測(cè)抗原 zui常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法,其次是競(jìng)爭(zhēng)法。但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競(jìng)爭(zhēng)法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
(2)檢測(cè)抗體 檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體,接下來(lái)是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡(jiǎn)單,但不適用于檢測(cè)其他種類的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺?/font>IgG存在將與IgM或IgA等競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗原。
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月
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